色谱分离操作条件的选择教程详解.ppt

第七章色谱分析法 一、 色谱柱及使用条件的选择 二、 载气种类和流速的选择 三、 其它操作条件的选择 一、 色谱柱及使用条件的选择 2. 固定液配比（涂渍量）的选择 3.柱长和柱内径的选择 柱材质 固定相 内径 膜厚 长度 不锈钢和熔融石英 共同点：良好的惰性和自由度 不锈钢的优势：良好的耐磨性和抗刮伤特性，可以缠绕为更小的尺寸，卓越的温度适应性。 熔融石英的优势：易于和保护柱连接，易于确认毛细柱内的高沸点污染物。 内径选择的基本原则： ★ 0.10mm口径柱适用于快速气相色谱分析。 ★ 0.25mm口径柱具有较高的柱效，用于标准的 GC/MS应用和分流/不分流分析。 ★ 0.32mm口径柱中等柱效，多用于不分流进样。 ★ 0.53mm口径柱，可以替代填充柱，适合于痕量分析。 增加色谱柱的内径，可以增加分离的样品量，但由于纵向扩散路径的增加，会使柱效降低。 较小的内径可以获得更好的分离度，或者在更短的时间内获得同样的分离度 膜厚选择的基本原则： ★ 增加膜厚可以提高分离度和加强保留，厚些的液膜可以有效降低过载拖尾峰和其他化合物的共流出。 ★ 如果样品的浓度范围很宽，就需要更厚的液膜，反之，如果目标组分的分离足够，并且没有共流出的问题，就可以使用比较薄的液膜，对于挥发性有机物来说，厚液膜更为合适。 ★ 液膜厚度的改变将直接影响化合物的流出温度。膜越厚，保留越强，流出温度相应也越高。 ★ 标准膜厚(0.25~0.5μm)：最广泛的应用，对于流出达到300℃的大多数样品分析效果良好。 ★ 薄液膜(0.1~0.2μm)：适合石化分析，甘油三酯等高沸点的物质。 ★ 厚液膜(1~5μm)：适合于流出温度在100~200℃之间的低沸点化合物 长度选择的基本原则： ★ 色谱柱越长，柱效越高。 ★ 选择可以满足分离度要求的最短的柱子。 ★ 如果即使是最长规格的色谱柱依然无法满足分离度的要求，请考虑更换固定相或膜厚。 ★ 分离度和柱长的平方根成正比，两倍的柱长只能增加40％的分离度。 ★ 标准柱(25~30m)：标准柱长，满足大部分应用。 ★ 短柱(5~15m)：通常用于10个组份以下简单样品的快速分析。 ★ 长柱(50m以上)：复杂样品分析。 恒温分析 ：保留时间由柱长决定，柱长加倍分析时间也加倍。 程升分析： 保留时间主要取决于柱温，分离度的提升和恒温分析类似，但分析时间只是略有增加。 由于分离度正比于柱长的平方根，所以增加柱长对分离是有利的。但增加柱长会使各组分的保留时间增加，延长分析时间。因此，在满足一定分离度的条件下，应尽可能使用较短的柱子。 5.柱温的确定 柱温的确定 二、 载气种类和流速的选择 2. 载气流速的选择 三、 其它操作条件的选择 2.气化温度的选择 * * 第四节 色谱分离操作条件的选择 1. 固定相的选择 气－液色谱，应根据“相似相溶”的原则 ①分离非极性组分时，通常选用非极性固定相。各组分按沸点顺序出峰，低沸点组分先出峰。 ② 分离极性组分时，一般选用极性固定液。各组分按极性大小顺序流出色谱柱，极性小的先出峰。 ③分离非极性和极性的（或易被极化的）混合物，一般选用极性固定液。此时，非极性组分先出峰，极性的（或易被极化的）组分后出峰。 ④ 醇、胺、水等强极性和能形成氢键的化合物的分离，通常选择极性或氢键性的固定液。 ⑤ 组成复杂、较难分离的试样，通常使用特殊固定液，或混合固定相。 配比：固定液在担体上的涂渍量，一般指的是固定液与担体的百分比，配比通常在5%～25%之间。 配比越低，担体上形成的液膜越薄，传质阻力越小，柱效越高，分析速度也越快。 配比较低时，固定相的负载量低，允许的进样量较小。分析工作中通常倾向于使用较低的配比。 增加柱长对提高分离度有利（分离度R正比于柱长L2），但组分的保留时间tR ↑ ，且柱阻力↑，不便操作。 柱长的选用原则是在能满足分离目的的前提下，尽可能选用较短的柱，有利于缩短分析时间。 填充色谱柱的柱长通常为1~3米，内径3~4厘米。 4.毛细管柱选择的要点 柱材质 柱内径 柱内径对分离度的影响 液膜厚度 液膜厚度对分离度的影响 色谱柱柱长 柱长对分析时间的影响 (1) 首先应使柱温控制在固定液的最高使用温度（超过该温度固定液易流失）和最低使用温度（低于此温度固定液以固体形式存在）范围之内。 (2) 柱温升高，分离度下降，色谱峰变窄变高。柱温↑，被测组分的挥发度↑，即被测组分在气相中的浓度↑，K↓，tR↓，低沸点组份峰易产生重叠。 (3) 柱温↓，分离度↑，分