第二章谷氨酸发酵分析.ppt

思考题 1.写出谷氨酸发酵的最理想途径，说明CO2固定化反应的重要性。 2.谷氨酸产生菌之所以能够合成、积累并分泌大量的GA，其菌种内在的原因有哪些？ 3.谷氨酸产生菌之所以能够在10%以上的葡萄糖培养基上，生产大量的GA,除了上述谷氨酸产生菌的内在本质外，其需要的外在条件有什么？ 思考题 4.谷氨酸发酵过程中，生物素（VH）作用表现在那几个方面？ 5.生物素（VH）如何封闭乙醛酸循环的？ 6.从能荷的角度解释谷氨酸发酵过程中，“只长菌，不产酸”的原因。 7.以谷氨酸发酵过程中pH值的变化规律为例，说明为什么pH值的变化是反应过程中菌体生长和产物合成的综合性指标？ * * * 4. 诱导酶合成 调节基因位点突变,不能编码调节蛋白； 添加底物结构类似物,使其与调节蛋白结合； 不断降低阻遏物的浓度(如连续发酵)； 年产12万吨味精，主要原辅材料耗用如下表：????项??目??????单位：吨????淀??粉??????196,870????液??氨?????? 31,108????硫??酸????? ?35,000????碳酸钠??? ?30,000????活性碳???? 2,500????液??碱????? 40,000????盐??????????? 8,000????消泡剂???? 77,960????淀粉酶???? 11,694 4）??发酵生产工艺? ??①培养基成分 碳源：碳源是构成菌体和合成谷氨酸的碳架及能量的来源。 谷氨酸产生菌是异养微生物，只能从有机物中获得碳素，细胞进行合成反应所需要能量也是从氧化分解有机物过程中得到的。 实际生产中以糖质原料为主。培养基中糖浓度对谷氨酸发酵有密切的关系。在一定的范围内，谷氨酸产量随糖浓度的增加而增加。 氮源：氮源是合成菌体蛋白质、核酸及谷氨酸的原料。碳氮比对谷氨酸发酵有很大影响。大约85%的氮源被用于合成谷氨酸，另外15%用于合成菌体。 谷氨酸发酵需要的氮源比一般发酵工业多得多，一般发酵工业碳氮比为100：0.2-2.0，谷氨酸发酵的碳氮比为100：15-21。 无机盐：是微生物维持生命活动不可缺少的物质。 主要功能：构成细胞的组成成分；作为酶的组成成分；激活或抑制酶的活力；调节培养基的渗透压；调节培养基的pH；调节培养基的氧化还原电位。起着调节微生物生命活动的作用。发酵时，使用的无机离子有K+、Mg2+、Fe2+、Mn2+等阳离子和PO43-、SO42-、Cl－等阴离子，其用量如下： ???????????KH2PO4? ?0.05%~0.2%? ???????????K2HPO4?? 0.05%~0.2%? ???????????MgSO4.7H2O ?0.005%~0.1%? ???????????FeSO4.7H2O? ?0.0005%~0.01%? ???????????MnSO4.4H2O ?0.0005%~0.005% 生物素：凡是微生物生命活动不可缺少，而微生物自身又不能合成的微量有机物质都称为生长因子。生长因子通常是指氨基酸、嘌呤、嘧啶和B族维生素的一种，生物素又叫维生素H或辅酶R。 糖质为碳源的谷氨酸产生菌几乎都是生物素缺陷型，这些细菌本身都不能合成生物素。生物素的作用是影响代谢途径；影响细胞的渗透性。 生长因子含量的多少，与生产有着十分密切的关系。实际生产中通过添加玉米浆、麸皮水解液、糖蜜等作为生长因子的来源，来满足谷氨酸产生菌必须的生长因子。 ②??培养基? a??斜面培养基? 葡萄糖?0.1%、牛肉膏?1.0%、?蛋白胨?1.0%、氯化钠?0.5%、琼脂?2.0%、pH?7.0~7.2 121℃灭菌30min 32℃培养18-24h (传代和保藏斜面不加葡萄糖)。 b? 一级种子、二级种子及发酵培养基? 一级种子??葡萄糖?2.5%、尿素?0.6%、KH2PO4?0.1%、MgSO4.7H2O?0.04%、玉米浆?2.3-3.0ml、pH?7.0, 1000ml装200-250ml振荡，32℃ 培养12h。 二级种子??水解糖?3.0%、尿素?0.6%、玉米浆?0.5-0.6ml、K2HPO4?0.1-0.2%、MgSO4.7H2O?0.04%、pH?7.0,呈单个或八字排列。活菌数为108-109 /ml。 发酵培养基??水解糖12-14%、尿素?0.5-0.8%、玉米浆?0.6ml、MgSO4.7H2O?0.06%、KCl?0.05%、Na2HPO4??0.17%、pH?7.0? ③?发酵条件的控制? a??温度 谷氨酸发酵