梅毒实验室诊断技术教程详解.pptVIP

梅毒血清学检测中注意的问题 一、梅毒的临床诊断 1、流行病学史（多性伴、不安全性行为、 有梅毒感染史、输血史等） 2、临床表现 3、实验室检查(证据） 梅毒血清学检测中注意的问题 二、用于监测疫情的检测策略 要使用ELISA（特异性抗体）进行筛查，（TPPA明胶凝集法、FTA-ABS荧光、TPHA凝集法）结果阴性者判定阴性结果，结果为阳性者必须进入复检。复检时要用非特异性抗体诊断方法RPR（快速血浆反应环状卡片实验）TRUST（甲苯胺红不加热血清反应学实验也称梅毒反应学实验）。结果阴性者判定阴性结果，结果为阳性者判定为阳性。 梅毒血清学检测中注意的问题 三、临床诊断时要注意的问题 1、根据中华人民共和国卫生行业标准（WS273-2007）有关梅毒临床诊断标准判定。 2、特异性抗体检验（TPPA、FSA-ABS、ELISA）可作为确证 实验。但不用于观察治疗效果，判定复发或再感染。表明既往或现患。 3、非特异性抗体检测（RPR、TRUST）可作为各期梅毒血清学诊断、但更主要用于治疗效果观察，复发，再感染的判定。（PPR、 TRUST等） 梅毒血清学检测中注意的问题 一、梅毒的临床诊断 1、流行病学史（多性伴、不安全性行为、 有梅毒感染史、输血史等） 2、临床表现 3、实验室检查(证据） 二、用于监测疫情的检测策略 要使用ELISA（特异性抗体）进行筛查，（TPPA明胶凝集法、FTA-ABS荧光、TPHA凝集法）结果阴性者判定阴性结果，结果为阳性者必须进入复检。复检时要用非特异性抗体诊断方法RPR（快速血浆反应环状卡片实验）TRUST（甲苯胺红不加热血清反应学实验也称梅毒反应学实验）。结果阴性者判定阴性结果，结果为阳性者判定为阳性。 三、临床诊断时要注意的问题 1、根据中华人民共和国卫生行业标准（WS273-2007）有关梅毒临床诊断标准判定。 2、特异性抗体检验（TPPA、FSA-ABS、ELISA）可作为确证 实验。但不用于观察治疗效果，判定复发或再感染。表明既往或现患。 3、非特异性抗体检测（RPR、TRUST）可作为各期梅毒血清学诊断、但更主要用于治疗效果观察，复发，再感染的判定。（PPR、 TRUST等） 非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点 前带现象 指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在高浓度的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴性反应的结果，而临床上又象二期梅毒，此时将血清稀释后再进行试验，出现了阳性的结果，该现象称为前带现象。 非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点 耐血清性（血清固定） 指经抗梅毒治疗后，非梅毒螺旋体抗原血清试验在一定时期内不阴转。早期的耐血清性常与治疗量不足或不规则治疗、复发、再感染或有神经系统梅毒等因素有关。 梅毒螺旋体抗原血清试验 梅毒螺旋体抗原血清试验是以梅毒螺旋体为抗原的特异性的抗原抗体反应，用以检测梅毒抗体。常用的方法有： 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA） 梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA） 梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA） 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（TP-WB）等 血清学检测法 TPPA试验 基本原理： TPPA试验是用超声裂解梅毒螺旋 体抗原，致敏明胶粒子，其致敏 粒子与待检血清中的抗梅毒螺旋 体抗体结合，产生肉眼可见的凝集。 仪器材料： 1. 微量震荡器 2. 试剂盒：“A”溶解用液、“B”标本稀释液、“C”致敏粒子、“D”未致敏粒子、“E”质控血清。 3．U型反应板 血清学检测法 TPPA试验 标本采集： 同RPR试验 操作步骤： 1．试剂准备：试验前将待检样本和试剂应恢复到室温。 2．加稀释液：每份样本做4孔，加B液至反应孔内，第1孔 100μL，第2～4孔各25μL。 3．样本稀释：取血清25μL加至第1孔，混匀后取25μL至 第2孔，连续倍比稀释至第4孔，最后1孔混匀后弃去25μL。 4．加对照液：第3孔加D液25μL，第4孔加C液25μL。 5．混合：将反应板置震荡器震荡30秒。 6．反应：置湿盒内，孵育2小时后，或放4℃冰箱过夜观察结