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小液流法测定植物组织水势 何宗财 （化学生物学09-1 【实验意义】 作物水分状况的表现指标中，生理指标的变化先于形态指标的出现。形态指标的出现时之后的，当植物出现缺水的形态指标时，植物已经收到伤害。小液流法测定植物组织水势可以测定一个科的一种植物，通过测定结果可以预知整个科属植物的水势，从而有力农肥的合理使用。 【实验原理】 测定植物组织水势的方法较多，小液流法是其中一种。本法是将植物组织置于不同浓度（也即不同水势）的蔗糖溶液中，寻找到一种浓度的蔗糖溶液，其水势与植物组织的水势相等，然后计算该浓度蔗糖溶液的水势，从而知道植物组织的水势。 表1 小液流法原理表 水势大小水分移动方向外液浓度外液比重Ψ组织Ψ外 组织→外液 降低 减小 Ψ组织Ψ外 组织←外液 增高 增大 Ψ组织=Ψ外 组织←→外液 不变 不变 测定蔗糖溶液比重的变化，可采用如下简便的方法：即利用毛细管吸取已浸过植物组织的蔗糖溶液（为便于观察，可用甲烯蓝先染上颜色），放一小滴到与其对应的相同浓度的蔗糖溶液中，然后观察滴出的小液滴（蓝色）的移动方向，即可知道浸过植物组织的蔗糖溶液比重的变化（“小液流法”即由此而来）。 【实验材料】： 女贞叶片 【仪器设备】： 试管架、6支带盖小药瓶（容积不大于5mL）、10mL带塞试管 6 支、毛细管 1支、叶模、镊子、移液管、吸球等 、温度计. 【试剂药品】 0.5mol/L 蔗糖溶液，亚甲烯蓝粉溶液 【实验步骤】 1．标准梯度浓度蔗糖溶液的配置 将0.5mol/L蔗糖溶液的母液分别配成0.05、0.1、0.2、0.3、0 4、0.5mol/L的蔗糖溶液各10ml.从上述的大试管中各取2ml溶液，分别放到另6支编号带盖小药瓶中，盖上盖子。 2．材料处理 取3片叶子重叠，用叶模分别在叶脉两侧各取5*1cm，然后把取出的五厘米长得叶分成10等分，最后得到60等分混匀，依次分别在小试管的蔗糖溶液中各放入叶圆片10片叶圆片要全部浸在溶液中，塞上塞子，每隔5分钟摇动一次。40分钟后，用镊子取出在小药瓶中德叶片，分别向6支小药瓶中滴入2滴亚甲烯蓝粉溶液。 3、测定 取干燥毛细管 6支，分别从编号的带盖小药瓶中吸取蓝色溶液，当毛细管不在上升以后，用吸水纸将毛细管外壁的蓝色溶液擦干净，然后插入与 编号的小药瓶相对应的 10m 1 试管中，使毛细管内的液面高于试管内的液面约 1 -2cm ，然后缓慢放出蓝色溶液一小滴，保持毛细管静止不动（可将毛细管壁靠在试管口上），观察蓝色小液滴的移动方向 , 然后缓慢取出毛细管插回 5mL 试管中。插入和取出毛细管时动作应缓慢并保持毛细管内溶液不漏出。毛细管与浓度应一一对应。 4、将蓝色小液滴移动方向填入下表中，若小液滴向上移动，则说明叶片组织水势大于该浓度蔗糖溶液的水势；若向下移动则相反；若静止不动，则说明叶片组织的水势与该蔗糖溶液的水势相等；如果在前一浓度中向下移动，而在后一浓度中向上移动，则植物组织的水势可取二种浓度蔗糖溶液水势的平均值。 5 、记录实验时的温度（℃） 编号 1 2 3 4 5 6蔗糖浓度/mol/ L 0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 小液滴运动方向 ↓ ↓ ↓ ↓ ↓ ↑ 【实验结果与讨论】 1 实验结果 蔗糖溶液的水势Ψ w= -iRCT 其中 i 为解离常数（蔗糖的 i=1 ） ,C 为溶液的摩尔浓度 ,R 为气体常数 ( 即 0.083*105Pa*mol-1*L-1*K-1 ),T 为绝对温度 , 即 273+t( 测定时的摄氏温度 ), Ψ s 为渗透势 , 单位为帕 (1 大气压 =1.013 × 10 5 帕 ) 。 有所测得是数据可知 C=(0.4+0.5)/2=0.45 mol/L 故相应编号中蔗糖溶液的水势 Ψ w= -0.083*105*0.45*293.15/109=-1.09MPa 2 讨论 2.1 指示剂的选择 在实验中显色剂是用的亚甲基蓝，由于在投放试剂的时候，粉末状的试剂很难控制用量，故分别配置成相应浓度的蔗糖溶液，然后加入亚甲基蓝配置成溶液，可以减小误差。 2.2 选择蔗糖溶液的优势 首先蔗糖只会引发水势的改变而不会引起离子浓度的改变，这也是不选这NaCl等离子溶液的原因。其次蔗糖是大分子物质不易被细胞吸收。第三蔗糖扩散慢，不