细胞衰老与凋亡详解.pptVIP

* 细胞衰老与凋亡 第一节　细胞衰老 一、Hayflick界限：细胞，至少是培养的细胞，不是不死的，而是有一定的寿命；它们的脂质能力不是无限的，而是有一定的界限 衰老是细胞本身决定的还是由于培养环境的恶化？ 以间期有无巴氏小体作为供体细胞的标记，将取自老年男性个体的细胞和取自年轻女性个体的细胞进行单独和混合培养，并统计其倍增次数。 结果：混合培养中的两类细胞的倍增次数与各自单独培养时相同。 说明决定细胞衰老的因素在细胞内部。 进一步实验发现是细胞核而不是细胞质决定了细胞衰老 二、细胞在体内条件下的衰老 近交系小鼠皮肤移植实验 结论：引起小鼠皮肤细胞在体内衰老的主要是体内环境。 更新组织：如上皮细胞、血细胞。构成更新组织的细胞可分为３类：① 干细胞、 ② 过渡细胞、 ③成熟细胞。 稳定组织：可补偿性增生，如：肝、肾细胞。 恒久组织：细胞不再分裂，如神经细胞。 可耗尽组织：如人类的卵巢实质细胞 三、细胞衰老的特征 （一）细胞核的变化 核增大 最明显的变化是核膜内折 另一个重要变化是染色质固缩【与染色质蛋白的二硫键有关】 核仁裂解为小体 （二）内质网的变化 （三）线粒体的变化 粗面内质网的总量减少，排列无序 线粒体的数量随年龄增大而减少，体积随年龄增大而增大 在培养的人成纤维细胞中有两种线粒体：Ⅰ型固缩紧密；Ⅱ型大而稀疏 （五）膜系统的变化 （四）致密体的生成 衰老细胞中常见的一种结构，绝大多数动物细胞在衰老是都会有致密体的积累 其他名称：脂褐质【通常产生自发荧光，是自由基诱发的脂质过氧化作用的产物】、老年色素、血褐质、黄色素、透明蜡体及残体等等 来源：溶酶体【多数。单层膜，有阳性磷酸酶反应】或线粒体【少数】转化 年轻的功能齐全的细胞的膜相是典型的液晶相 衰老的或有缺陷的膜通常处于凝胶相或固相【磷脂的脂肪酸尾不能自由移动】 细胞衰老时，细胞间间隙连接及膜内颗粒的分布也发生变化 P面膜内颗粒明显减少，E面颗粒相对增加，但总颗粒数变化不显著 细胞间间隙连接减少 分子水平的变化 1.?DNA：复制与转录受阻，端粒DNA、mtDNA缺失。DNA氧化、断裂、缺失和交联，甲基化程度降低。 2.? RNA：含量减少。 3.?蛋白质：含成下降，发生修饰、交联。 4.? 酶分子：物理与化学特征改变，酶失活。 5.?脂类：不饱和脂肪酸被氧化。 三、细胞衰老的分子机理 （一）氧化损伤学说 观点：代谢中产生的活性氧基团或分子（ROS）引发的氧化性损伤的积累，最终导致衰老。 ROS主要有三种类型：1.超氧自由基；2.羟自由基；3.过氧化氢 内源性自由基产生于①由线粒体呼吸链电子泄漏产生；②由氧化酶（如MFO）催化底物羟化产生 来源：外源性（如辐射）、内源性。 自由基可引起DNA、蛋白质、脂类氧化、变性和交联，实验表明DNA中OH8dG随着年龄而增加。 正常细胞内存在清除自由基的防御系统。 酶系统：SOD、CAT、GSH-PX。 非酶系统：维生素E、醌类电子受体 Orr和Sohal（1994），将SOD基因导入果蝇，其寿命比野生型延长1/3。 （二）端粒学说 端粒酶：是一种核糖核蛋白酶，由RNA和蛋白质组成。 端粒酶RNA是合成端粒DNA的模板，而端粒酶的反转录酶亚基则催化端粒DNA的合成 有丝分裂钟学说【Harley】：随着细胞的每次分裂，端粒不断缩短；当端粒长度缩短达到一个阈值时，细胞就进入衰老 Wright等的证据 细胞衰老指标：β半乳糖苷酶活性 （三）rDNA与衰老 （四）沉默信息调节蛋白复合物与衰老 （五）SGS1基因、WRN基因与衰老 适用于哺乳类中由分裂细胞组成的组织 酵母中发现 通过同源重组产生的第一份环状rDNA片段会澎冲而出，成为染色体外rDNA环【ERC】，随细胞分裂不断进行，ERC不断复制增加，到一定程度，细胞衰老 类型：简称Sir复合物，包括Sir1、Sir2、Sir3、Sir4。 分布：通常存在于异染色质中。一方面与RAP1和组蛋白H3/H4 结合；一方面附在核基质上。 酵母中，Sir复合物通常存在于端粒及性别决定有关的HML和HMR位点上 功能：阻止它们所在位点的DNA转录。 酵母中发现一种sgs1突变体【SGS1基因缺陷或丧失】 ，寿命短于野生型。该基因编码的蛋白质属于RecQ亚族的DNA解旋酶。集中在核仁。核仁若缺少该蛋白就会裂解。 Werner综合症【引发早老的疾病】：WRN基因与SGS1基因同源，编码的蛋白质具有7个DNA解旋酶所特有的标志序列，位于核仁。 Werners synd