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血细胞形态学讲义 血液和骨髓瑞氏染色形态学检查法 通过分析血液和骨髓中有核细胞数量、相对构成比、形态改变,了解骨髓造血功能状态和异常改变的形态学检查方法。 形态学检查方法的价值 发现血细胞构成和形态异常 了解骨髓造血功状态 对血液病提供确诊依据或提供重要线索 是各种血液病形态学检查的基础 形态学检查方法的局限性 不能了解骨髓结构 不能了解细胞分子生物学特性和功能 内 容 第一部分 标本制作 第二部分 单个血细胞形态 第三部分 骨髓和外周血有核细胞构成比 第四部分 正常骨髓报告书写 第一部分 标 本 制 作 一、骨髓血细胞检查适应症 患者多次检查外周血有异常 患者有原因未明的肝、脾、淋巴结肿大 查明感染的原因 查明恶性肿瘤有无转移 助诊类脂质沉积病 对血液病进行鉴别诊断和疗效观察 二、血液和骨髓标本的来源 一般在髂前上棘或髂后上棘穿刺,必要时行胸骨穿刺,儿童还可以选择胫骨。骨髓穿刺成功的标志:抽吸骨髓时患者感锐痛,骨髓液外观红色粘稠性、有骨髓小粒、油滴。如稀薄白色油滴状见于典型的再障,乳白色见于骨髓坏死。显微镜下见有骨髓成分(如幼红细胞、幼粒细胞、巨核细胞、浆细胞、网状细胞等) 三、血液和骨髓标本的制作 见幻灯 四、血液和骨髓标本的瑞氏染色 选取长短厚薄适宜的涂片 (骨髓2张、血片2张)进行瑞氏染色。瑞氏染液:缓冲液1:2时间1小时,小水流冲洗,自然凉干后备检。瑞氏染液含美蓝和伊红两种成分,美蓝偏碱性,与细胞内酸性物质有亲和力(胞 浆),染成兰色;伊红偏酸性,与细胞内碱性物质有亲和力(胞核),染成红色。 光学显微镜使用 显微镜使用注意事项 低倍镜(10倍):判断取材、涂片、染色是否满意,小粒、油滴分级;骨髓增生程度;估计小粒造血细胞面积;计数全片巨核细胞数目;寻找瘤细胞团。 油镜下(100倍):观察单个血细胞形态。 小粒分级(1) 肉眼及低倍镜下观察: (-) 无骨髓小粒 (+) 骨髓小粒稀疏,相隔较远 (++)骨髓小粒较密集,涂片后于血膜尾部甚易发现 (+++)骨髓小粒十分密集,彼此紧密相连,涂片后于全片都易发现 小粒分级(2) 显微镜(100 倍油镜): 估计小粒造血细胞面积:各种细胞(除脂肪细胞外)占整个骨髓小粒面积的百分比,结果取10个小粒的平均值,在正常骨髓中,小粒造血面积50-75%。如骨髓小粒全部为脂肪细胞占据,按理为 0%,但为避免绝对化,应记录5%,同理如骨髓小粒全部为造血细胞,按理 小粒分级(3) 为100%,应 记录95%。 细胞成份分析:造血细胞、非造血细胞。造血细胞为幼稚粒、红细胞;非造血细胞为脂肪细胞、成熟淋巴细胞、浆细胞、组织嗜碱细胞、网状细胞等。 小粒分级(4) 临床意义: 骨髓小粒:正常骨髓中+-++;急、亚急及慢性粒细胞白血病和红白血病多为(++)或(+++),淋巴细胞白血病多无粒、无油。 骨髓小粒造血面积及细胞成分:慢性再障多在50%以下,以非造血细胞为主,造血细胞很少;各种白血病及增生性贫血多在75%以上,以造血细胞为主。 油滴分级(1) (-) 无油滴 (+) 油滴少且小,呈细沙状,均匀分布,涂片后于血膜尾部有很少油滴 (++)油滴稍多且大,有的直径达1mm以上,涂片后于血膜尾部有油滴,不易干燥。 (+++)油滴聚集成片 油滴分级(2) 临床意义: 慢性再障:最为多见,达++或+++,各型急、慢性白血病多数为(-),少数为(+) 正常骨髓一般(+-++) 增生程度分级 增生程度 RBC与有核细胞之比 常见病 增生极度活跃 1:1 各类白血病 增生明显活跃 10:1 各类白血病 增贫 增生活跃 20:1 正常骨髓、某些贫血 增生减低 50:1 慢性再障 增生极度减低 300:1 急性再障 、急停 第二部分 正常血细胞形态 (一) 骨髓血细胞分化 正常情况下,在造血干细胞分化、发育、成熟的整个演变过程中,存在一定的规律性。造血干细胞逐级分化形成各系列、各阶段的骨髓血细胞,造血干、祖细胞在形态上无法鉴别,
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