研究生开题报告技术方案.ppt

[19] Vaillant C, Didier-Bazes M, Hutter A, Belin MF, Thomasset N Spatiotemporal expression patterns of metalloproteinases and their inhibitors in the postnatal developing rat cerebellum. J Neurosci .1999;19:4994-5004. [20] Zuo J, Ferguson TA, Hernandez YJ, Stetler-Stevenson WG, Muir D (1998) Neuronal matrix metalloproteinase-2 degrades and inactivates a neurite-inhibiting chondroitin sulfate proteoglycan. J Neurosci .1998;18:5203-5211. [21] Jourquin J,Tremblay E,Decanis N,et al.Neurol activity-dependent increase of net matrix metalloproteinase activity is associated with MMP-9 neurotoxicity after kainite.Eur J Neurosci.2003 Sep;18(6):1507-17. [22] Steward O . mRNA localization in neurons: a multipurpose mechanism? Neuron 1997;18:9-12. [23] Zhang JW,DebS,Gottschall PE.Ragional and age-related expression of gelatinases in the brains of young and old rats after treatmeant with kainic [24]Rivera S,Ogier C,Jourquin J,et al.Gelatinase B and TIMP-1 are regulated in a cell-and time-dependent manner in association with neuronal death and glial reactivity after global forebrain ischemia.Eur J Neurosci.2002 Jan;15(1):19-32. 三、主要研究内容和解决的主要问题（课题设计内容，论证课题成立依据，可能出现的问题及解决方案） 课题设计内容：海人酸诱导大鼠痫性发作，通过研究其血脑屏障通透性的改变，MMP-9的表达，寻找它们之间可能存在的联系，从而论证与癫痫发病的关系。 课题成立依据：癫痫患者可能存在血脑屏障通透性的增加，兴奋毒性发作MMP-9在特定脑区表达增多，它们之间通过炎症因子存在着复杂的联系，参与癫痫免疫学发病机制。 可能出现的问题及解决方案：进行预实验寻找合适的实验条件，减少实验过程中不必要的失败 四、研究工作计划与方案（研究方法与技术、观察指标、研究途径、现有设备条件、负责及参加单位、时间安排、经费使用） 1.研究方法与技术：采用免疫组化S-P三步法，尼氏染色。 2%伊文思蓝生理盐水用于检测血脑屏障的通透性。 2.观察指标为MMP-9蛋白表达。MMP-9蛋白阳性染色主要定位于大鼠海马CA1和CA3锥体层和齿状回颗粒细胞层，为淡黑色颗粒。 3.工作计划: 2004.11-2005.3 撰写综述 2005.4-5 收集实验所需标本，购买实验所需试剂,进行预实验 2005.5-8 正式开始实验。 2005.9-12 整理、分析实验结果，撰写论文。 4.此课题约需经费4000元左右，我们预计可以完成本课题。 学术论文开题报告 基质金属蛋白酶与癫痫发病的关系 专业名称：神经病学 研究方向：癫痫 协作单位：青大医学院 日期：2004年12月28日 一、选题的目的和意义（主要说明：进行研究的必要性、预期达到的目的、实际应用价值和学术意义） 本研究是为了明确基质金属蛋白酶及其组织相容性抑制因子（MMPs/TIMPs）是否参与了癫痫的发病，可能是以怎样的机制参与。通过该试验，应可证实：MMPs/TIMPs，主要是MMP-9/TIMP-1参与了癫痫的发病，可能是通过增加了血脑屏障的通透性，加强了脑内的免疫反应，损害了神经元与神经胶质细胞，影响突出重建，从而影响癫痫放电环路的形成。同时该试验可指导临床上选择特异性MMPs抑制因子，抑制