高效液相色谱仪器维护和保养要点分析.pptVIP

高效液相色谱仪器维护和保养 脱气机的操作 标准脱气机 标准脱气机每个通道体积为12ml，建议排液操作：5ml/min 排液6min以上。 微脱气机 微脱每个通道体积为1ml，建议排液操作：2ml/min 排液5min。 切勿用5ml/min 流速去排液。 在线脱气机日常维护 Agilent 1100 泵头 Pump Head 结构图 带有Seal Wash的泵头结构图 Agilent 四元／二元/单元泵日常维护 Agilent 四元／二元/单元泵日常维护 Agilent 四元／二元/单元泵日常维护 四元／二元/单元泵日常维护 四元／二元/单元泵日常维护 泵的使用须知 当泵头安装有冲洗附件时，由于该附件中也有密封垫，这样就会增加活塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10％异丙醇，并将其流速调至约20滴/分钟使这溶液流过冲洗装置。 10％异丙醇有助于降低水的表面张力，并有抑菌作用。不要用其它溶剂代替。 当泵头安装有冲洗附件而不开启10％异丙醇，会使密封垫及活塞杆的寿命减短。 泵的使用须知 密封垫磨合操作： 1.以异丙醇作为溶剂并将其管道直接连接到主动阀。 2.连接阻尼管于排液阀的出口，阻尼管的另一端置于废液瓶中。 3.打开排液阀，并用异丙醇以2ml/min的流速冲洗系统10分钟。 4.关闭排液阀，设置流速使压力达到350bar，并使系统在此压力下保持15分钟。 5.关闭泵，缓慢打开排液阀释放压力，重新连接管路，然后冲洗系统中的异丙醇。 注意，只有反相密封垫才需此操作，而正相密封垫因其最高只耐受200bar,所以此操作会损害它。 流动相的更换——更换互溶流动相 流动相的更换——换缓冲液流动相 1用水更换色谱系统中缓冲液 2用水含量在10%~60%范围的溶剂冲洗色谱柱中的盐 3用新流动相更换水或冲洗色谱柱溶剂 检测器使用注意事项及日常维护 可变波长紫外检测器使用注意事项. 如果流动池被污染可先用以下方法处理:在不连接色谱柱的情况下先用高纯水冲洗20分钟，然后用5％硝酸冲洗2小时，最后再用高纯水冲洗至流出液中性即可。 如上述方法不果，就需更换流动池的检测窗。 上述处理方法也适用于DAD的流动池。 检测器使用注意事项及日常维护 荧光检测器使用注意事项及日常维护. 由于水性流动相长时间留在流动池会有藻类生长，而藻类会产生荧光，所以可添加有机溶剂如5％的乙腈或甲醇。 如怀疑流动池被污染可用以下步骤清洗之： 1 用双蒸水冲洗30分钟以上. 2 用注射器注射65％硝酸入流动池并使其留在流动池约1小时。（注意，为了防止过压，请缓慢注射 . 3 用双蒸水冲洗干净。 HPLC日常维护 HPLC常用的色谱柱接头 HPLC故障诊断 系统压力过高。 1 首先拧开排液阀，以纯水作流动相并设流速为5ml/min若压力超过10bar，应先更换排液阀的虑芯。 2 若排液阀的虑芯没有堵塞，卸下色谱柱，然后用一两通代替色谱柱，以水作流动相设流速为1ml/min。通常压力不会超过20bar,否则系统可能有堵塞。 3 若上述的压力超过20bar,我们可按照从后到前的原则，也就是说先卸下进流动池的连接管接头，开泵后，若压力正常则流动池堵塞若仍不正常可将这段管另一端也卸下，开泵后再观察压力情况。 同样道理，我们就可以找到堵塞的地方。 容易堵塞的地方：流动池入口管；自动进样器的针及针座；柱温箱 HPLC故障诊断 系统压力过低，不稳定或没液流。 首先拧开排液阀，设流速1~2ml/min后开泵，观察有无液流，若有再仔细观察液流是否有倒吸现象如不能确定可用量筒测量流速的准确性。 如上述无液流，或流速不准多数为主动阀阀芯或主动阀故障， 或泵有严重漏液。 怎样是大致判断主动阀抑或其阀芯故障？可用以下方法：当泵运转时用手指轻捏主动主体，正常的主动阀能感到有节奏的脉动，如果没有， 主动阀有问题。如果有则可以将主动阀阀芯取出进行超声波清洗，如仍有问题，可更换阀芯。注意，千万不要把整个主动阀放入超声波清洗这样会损坏主动阀。 若上述流速准确但拧紧排液阀后压力不稳定，请仔细检查有无漏液。 通常漏液地方：各接口包括色谱柱，泵，进样阀等 。 HPLC故障诊断 保留时间不稳定。 首先观察保留时间是否有规律的变化，并同时观察压力是否稳定 若压力稳定而保留时间呈有规律变化，多数是色谱柱未平衡好，特别是含有盐的流动相，需较长的时间去平衡。 若压力稳定而保留时间无规律变化，请检查溶剂过滤头及真空腔是否有堵塞。再平衡色谱柱足够时间，如仍然不佳，可更换一色谱柱。 若压力不稳定，请检查造成压力不稳定的因素，如：漏液，排液时间不足够，盐浓度过高导致盐析，主动阀比例阀内漏，等。 HPLC故障诊断 峰面积重现性不好。 首先观察压力是否稳定，以及观察峰面积变化是否有规律。 若压力不稳定，请检