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实验十四 杂交瘤技术 1. 实验目的 掌握杂交瘤技术的基本原理和基本操作方法。 能运用杂交瘤技术来制备自己所需要的单克隆抗体。 2. 实验原理 杂交瘤技术产生的3个技术关键 动物免疫 细胞融合 杂交瘤细胞的筛选和克隆 细胞融合方法 病毒介导的细胞融合 PEG介导的细胞融合 电激融合 3.实验材料、用品 实验材料8～12周龄BALB/c纯系小鼠10只；SP2/0-AG14骨髓瘤细胞；灭活人轮状病毒（用作抗原）。： 实验用品 仪器与用具：超净工作台、普通离心机、倒置显微镜、酶联免疫检测仪、CO2恒温培养箱、恒温水浴、烤箱、高压灭菌锅。血细胞计数板、25ml和50ml培养瓶、96孔和24孔培养板各、40孔酶标板、50ml塑料离心管、10ml玻璃离心管、lml、5ml和10ml吸管、6cm培养皿、100ml和50ml培养液瓶各、1ml、5ml和10ml注射器各、小滴管、玻璃套管、手术剪刀、手术镊、6号针头、L型6号针头、500ml和1000ml烧杯、酒精灯、不锈钢网(5×5cm 200目)、解剖盘、培养液抽滤灭菌装置。 试剂： RPMI 1640培养基、小牛血清(FCS)、GKN液、50％PEG液、HT培养液、HAT培养液、0.5％胎酚蓝、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、包被液、底物反应液、辣根过氧化物酶—羊(或兔)抗鼠IgG、青霉素、