基本培养技术概述.ppt

（一）、茎尖脱毒 1、茎尖脱毒的原理 病毒在植物体内分布是不均一的，越接近生长点约（0.1-1mm区域），病毒浓度越稀，因此有可能采用小的茎尖离体培养而脱除植物病毒。 A、液体培养法液体培养液层0.5mm左右，可以加入一些Ficoll作为漂浮剂，使花药全部不下沉而漂浮在液面上，这样通气良好，提高了培养效果， 要注意及时转移沉于瓶底部的长大的愈伤组织，否则会影响再分化培养的效果 液体培养具有一定的优越性：在液体培养中不存在位置效应； 可以在培养过程中补加新鲜培养基和重新调整培养基的成分；液体培养有利于花粉粒的释放及分裂形成愈伤组织 但如何掌握转分化的时期等细微环节直接影响到花药培养的效果 液体培养 B、双层培养在35mm*10mm的小培养皿中铺加一层（1ml）琼脂培养基，固化后，在其表面再加入0.5ml的液体培养基。 优点：花药在培养的早期可以从活性高的液体培养基中汲取营养，花粉胚长大后又不会沉没，可以在通气良好的条件下分化成植株。 C、条件培养基培养用预先培养过花药的液体培养基再次进行花药培养，可使花药培养效率大大提高。 条件培养基不存在种的特异性，例如培养过小麦花药的培养基对大麦同样有效。 4、花药培养中单倍体形成的途径 A、通过胚状体形成单倍体植株 ?低浓度激素B、通过愈伤组织形成植株 高浓度生长素