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DNA粗提取与鉴定1.ppt
* 专题五 DNA和蛋白质技术 课题1 DNA的粗提取与鉴定 一、基础知识 1、DNA的溶解性 高浓度NaCl溶液，DNA溶解度高,过滤除去不溶的杂质。 0.14mol/LNaCl溶液，DNA溶解度低，析出DNA，过滤除去可溶的杂质。 DNA不溶于酒精 细胞中的某些蛋白质则溶于酒精 (1) 酶 (2) 高温 2、DNA的耐受性 蛋白酶水解蛋白质而不会对DNA产生影响。 大多数蛋白质60-80℃变性， DNA在80℃以上才会变性。 瓦解细胞膜，但对DNA无影响。 (3) 洗涤剂 一、基础知识 在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色。 3、DNA的显色反应 DNA遇甲基绿呈现绿色。 一、基础知识 二、实验材料 动物材料：鸡血 三、实验步骤 1、破碎细胞，获取含DNA的滤液 植物材料：菜花 吸水涨破 细胞壁：研磨 细胞膜：洗涤剂 滤液中可能含有哪些细胞成分？ 怎样进一步提取滤液中的DNA？ 三、实验步骤 2、去除滤液中的杂质 利用DNA在NaCl溶液中溶解度。 利用酶的专一性。 利用温度的耐受性。 三、实验步骤 3、DNA的析出 怎样进一步纯化提取出的DNA？ 纯的DNA应该是什么颜色？ 利用DNA不能溶于酒精溶液，纯化出白色丝状的DNA。 三、实验步骤 4、DNA的鉴定 甲 乙 高浓度NaCl溶液 DNA粗提取物 二苯胺试剂 现象 步骤 试管号 a ml a ml 适量 —— b ml b ml 沸水浴加热 溶液变蓝 溶液不变色 现用现配 试验管 对照管 *
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