植物组织培养实用技术讲义.pptVIP

龙牙百合特征:鳞茎，无皮，广卵形，外部鳞片长,将整个鳞茎包裹，直径5~15厘米，白色，茎高90厘米左右，直立茎上叶多而散生，披针形，叶色从浓绿，光滑。花单生茎顶。花朵呈喇叭状长筒形，白色，有清香。 一、外植体的选择 龙牙百合的许多器官、组织都可作为外植体，如鳞片、花梗、叶片、茎尖、腋芽、花瓣、花托、花丝、花药、胚、子房、根尖等，其中采用鳞片作外植体的较多。 以鳞片为例，在选取外植体时，要选择具备龙牙百合品种特征、无病虫害危害的种球。外部鳞片易污染要将其剥离，中部鳞片肉质厚，生长势强，易诱导小鳞茎，是最佳的外植体。内部鳞片幼嫩，诱导率低，不易产生小鳞茎，故不宜采用。就季节性而言，以秋、冬季的鳞片分化成小鳞茎的能力最强， 二、外植体的消毒 由于龙牙百合鳞茎都生长在土中，受土壤微生物的影响，所以一般都会有污染。为此外植体消毒要严加注意，鳞片先用流线形自来水冲洗12小时以上进行预灭菌 再用70%酒精消毒1min，用0.1%升汞消毒10 min 最后用无菌水冲洗4~6次，用无菌吸水纸吸干水分。 三、外植体的原代培养 在同一块鳞片上，其中部被诱导产生小鳞茎的能力最强，诱导出的小鳞茎生长速度也相对较快，而两头位置相对要差些，所以在进行原代培养时，要取已消毒外植体的中部 将其切成1~2cm2大小，背部朝下置于MS+NAA 0.03mg/kg+琼脂0.7%+蔗糖3%培养基上培养。 培养条件为：