重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子的摇瓶发酵研究重点.docVIP

重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子的摇瓶发酵研究 马 莉，白 泉，王骊丽，斯 琴，耿信笃 （西北大学 现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室，陕西 西安 710069） 摘 要：为了优化重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子摇瓶发酵工艺，利用摇瓶法选择出最佳的rhGM-CSF的培养条件。结果表明：最佳条件为培养温度32℃，初始pH值7.2(7.4，摇床转速200 r/min，种子菌龄在OD600为1.0左右时接种，并在对数生长前期0.5(0.8之间诱导4 h。在此优化的培养条件下，在摇瓶中使用M9培养基时，rhGM-CSF的表达量占菌体总蛋白的24.3%，OD600达5.35，说明构建的rhGM-CSF工程菌发酵的稳定性和重复性良好，可为rhGM-CSF的大规模生产提供可靠的放大依据。 关 键 词：重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子；大肠杆菌；摇瓶发酵 中图分类号：TQ920.6 文献标识码：A 文章编号：1000-274X(2004)0117-08 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(human granulocyte-macrophage colony stimulating factor, hGM-CSF)是一种重要的造血调控因子[1]，对各种原因尤其是癌症患者化疗后引起的白细胞减少症有明显的疗效。由于天然人GM-CSF来源有限，产量甚微，不能