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- 2016-06-07 发布于湖北
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流式细胞技术
1.流式细胞技术的特点及影响因素:
特点:“六高一低” 高精度、高速度、高灵敏度、高纯度、高效率、高科技含量
低分辨率
影响因素:“三稳定一确保”
细胞荧光染色的实验条件要稳定
正交光电测量系统要稳定
鞘液流速系统要稳定
确保细胞悬液分散均匀,不得混有过量的杂质
2.流式细胞分析技术在细胞生物学中的应用:
1.细胞表面分子分析(淋巴细胞分型/白细胞分型)
2.DNA含量、细胞周期/细胞凋亡的检测与分析
3.血小板及其活化分析
4.胞内蛋白质分析(细胞因子/转染率检测)
5.可溶性蛋白质检测(CBA法)
6.细胞功能分析
7.其他(牛奶微生物检测)
流式细胞仪包括:光学系统,液流系统,数据处理系统,检测系统
原理:经染色的细胞或微球在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当细胞或微球经过焦点时,发出一束散射光和(或)荧光,并经过滤光镜系统收集到达一个光电检测器,光电检测器把光信号定量转化成电信号,经数字转换器进行数字化后而成整数,然后进行电子存储数据。数据以直方图,二维散点图,等高线图,灰度图以及三维图等多种形式显示,分析。
流式细胞步骤:
每组取两个EP管,分别标记为ISO(对照组)和TEST(实验组),每管加入100uL全血;
在
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