免疫实验技术创新.docVIP

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  • 2016-06-07 发布于湖北
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流式细胞技术 1.流式细胞技术的特点及影响因素: 特点:“六高一低” 高精度、高速度、高灵敏度、高纯度、高效率、高科技含量 低分辨率 影响因素:“三稳定一确保” 细胞荧光染色的实验条件要稳定 正交光电测量系统要稳定 鞘液流速系统要稳定 确保细胞悬液分散均匀,不得混有过量的杂质 2.流式细胞分析技术在细胞生物学中的应用: 1.细胞表面分子分析(淋巴细胞分型/白细胞分型) 2.DNA含量、细胞周期/细胞凋亡的检测与分析 3.血小板及其活化分析 4.胞内蛋白质分析(细胞因子/转染率检测) 5.可溶性蛋白质检测(CBA法) 6.细胞功能分析 7.其他(牛奶微生物检测) 流式细胞仪包括:光学系统,液流系统,数据处理系统,检测系统 原理:经染色的细胞或微球在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当细胞或微球经过焦点时,发出一束散射光和(或)荧光,并经过滤光镜系统收集到达一个光电检测器,光电检测器把光信号定量转化成电信号,经数字转换器进行数字化后而成整数,然后进行电子存储数据。数据以直方图,二维散点图,等高线图,灰度图以及三维图等多种形式显示,分析。 流式细胞步骤: 每组取两个EP管,分别标记为ISO(对照组)和TEST(实验组),每管加入100uL全血; 在

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