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- 2016-06-07 发布于湖北
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微波法提取罗布麻和山楂叶的总黄酮类化合物
及它们抗氧化活性的测定比较和应用探究
摘 要
罗布麻和山楂叶都含有大量的黄酮类化合物,黄酮类化合物及采用紫外光分光亮度法测定比较其含量以更好更广泛的应用它们,通过它们提取得到的黄酮类化合物对色拉油的作用以比较它们的抗氧化活性,以及通过与抗坏血酸和柠檬酸的抗氧化活 性的比较,以更深入了解它们的抗氧化活性以更好的利用在生活的方方面面。
关键词 罗布麻 山楂叶 黄酮类化合物 微波法 紫外光分光亮度法 抗氧化活性
1 前言
罗布麻是夹竹桃科茶叶花属作物,山楂为蔷薇科山楂属植物,它们入药在我国的历史都非常的悠久,1977年罗布麻正式录入《中华人民共和国药典》,罗布麻全草可入药,性甘苦、微寒,有平心悸、止眩晕、消咳止喘、强心利尿等多种功效。主治高血压,对中老年人肥胖、便秘、气喘、心悸等症尤为适宜。据《本草纲目》记载,山楂有“酸甘味温, 消食积, 补脾”。罗布麻和山楂叶都含有丰富的黄酮类化合物,许多研究已表明黄酮类化合物具有多种生物活性,除利用其抗菌、消炎、抗突变、降压、清热解毒、镇静、利尿等作用外,在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方面也有显着效果,是天然提取的抗氧化剂中重要的抗氧化成分。通过微波法快速高效的提取它们的黄酮类化合物,以及通过紫外光分光亮度法测定其含量,并进一步测定比较其抗氧化活性,再与抗坏血酸和柠檬酸等常用的抗氧化剂的抗氧化活性比较。不仅可以在量上更为了解它们的含量与差异,还更充分的把它们具有抗氧化活性而在医学,实验,生活各方面上的应用,为充分利用我国的植物资源,进一步研究和利用它们提取物做基础性研究。
2 实验目的
2.1了解罗布麻和山楂叶的黄铜类化合物含量
2.2 探究比较罗布麻和山楂叶的抗氧化活性及它们的应用
2.3了解和掌握微波法提取黄铜类化合物的原理与技术
2.4了解和掌握紫外光分光亮度法测定黄铜类化合物等的原理与技术
2.5 掌握测定抗氧化活性的实验方法与技术
3 实验原理
3.1 微波法提取罗布麻和山楂叶黄酮类化合物的原理
罗布麻和山楂叶都含有大量的黄酮类化合物,黄酮类化合物是一类在植物界中分布广泛、具有多种生物活性的化合物,由于这类化合物呈黄色或淡黄色,且分子中亦多含有酮基因此被成为黄酮。根据黄酮类化合物的溶解性和酸性, 相似相溶与酸碱理论原理。提取黄酮类化合物一般方法有水提法,碱性水或碱性稀醇法,有机溶剂法,解酶法和微波法等,其中利用微波法提取黄酮类化合物的提取率比较高,而且快速时间短。
微波法原理是利用磁控管所产生的24多亿次/s超高频率的快速震动,使材料内分子间相互碰撞、挤压,利于有效成分的浸出。此法不仅具有反应高效性和强选择性等特点,还具有操作简单、副产物少、产率高及产物易提纯等优点。浸出过程中材料细粉不凝聚、不糊化,克服了热水法易凝聚、糊化的不足。
3.2 紫外光分光亮度法测定罗布麻和山楂叶的黄酮类化合物的原理
由于不同植物提取的黄酮类化合物的成分不一样,所以所用的紫外光分光亮度法测定时的标准溶液和测定吸收波波长不同。有关文献表明:以槲皮素为标准品,用紫外光分光亮度法测定罗布麻中的黄酮类化合物的含量可行性比较高;以芦丁为标准品,用紫外光分光亮度法测定山楂叶中的黄酮类化合物的含量可行性比较高。
3.2.1 紫外光分光亮度法测定罗布麻的黄酮类化合物的含量
槲皮素对照品溶液,在190~600nm区间测定其吸收波长,在210nm处有最大吸收,罗布麻的黄铜类化合物在210nm处也有最大吸收,因此我们选定210nm为检测波长。 在210nm处测定不同浓度对照品溶液吸收度。绘制标准曲线,回归方程为:Y=11.54X+0.175,r=0.99996(其中Y为吸亮度,X为样品浓度,r为相关系数)。
3.2.2 紫外光分光亮度法测定山楂叶的黄酮类化合物的含量
芦丁对照品溶液,在波长300~800nm内进行光谱扫描,在500nm处有最大吸收,山楂叶的黄酮类化合物也500nm处也有最大吸收,故选择测定波长为500nm。在500nm处测定不同浓度对照品溶液吸收度。绘制标准曲线,回归方程为:A=10.406C-0.0006,r=0.9997(其中A为吸亮度,C为样品浓度,r为相关系数)。
3.3 罗布麻和山楂叶的黄酮类化合物的抗氧化活性的测定原理
油脂在空气中会被氧化而产生过氧化物,根据黄酮类化合物具有抗氧化活性的性质,将提取得到的黄酮类化合物作用于油脂从而降低其氧化速度。油脂氧化产生的过氧化物与还原性碘化钾反应生成游离的游离碘,再以硫代硫酸钠滴定碘离子,通过消耗硫代硫酸钠的量而测定计算出油脂的过氧化值(POV)。过氧化值越大,说明油脂被氧化越快,样品的抗氧化活性就越低;过氧化值越小,说明油脂被氧化越慢,样品的抗氧化活性就越高。其中过氧化值(POV)为:POV
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