生化实验1创新.doc

生物化学实验报告 姓 名： 许梨梨 学 号： 3120100024 专业年级： 2013级医学影像学 生物化学与分子生物学实验教学中心 实验名称 实验日期 201410-24 实验地点 合作者 许琮 指导老师 何肖娟评分 教师签名 批改日期 实验目的 2.掌握氨基酸薄层层析法的基本操作技术。 3.掌握如何根据移动速率（Rf值）来鉴定被分离的物质（即氨基酸混合液）。 二实验原理 薄层层析法 -解吸-再吸附-再解吸的反复进行，而将样品各组分分离开来。 吸附薄层中常用的吸附剂为氧化铝和硅胶。层析用硅胶是一种多孔性物质，它的硅氧环交链结构表面上密布极性硅醇基，这种极性的硅醇基能和许多化合物形成氢键而产生吸附。 本实验采用硅胶吸附薄层层析。硅胶吸附薄层层析的特点：1.硅胶的吸附能力比氧化铝稍弱，其吸附活性也与含水量呈负性相关。2.硅醇基显较弱的酸性，因而，硅胶只能用于中性、或酸性成分的分离，碱性成分不能用它分离。3.硅胶的活化温度通常为105℃－110℃，不能过高。 （二）氨基酸与茚三酮的显色反应 茚三酮水化后生成水化茚三酮，它与氨基酸发生羧基反应生成还原茚三酮、氨基酸，与此同时。还原茚三酮又与氨基茚三酮缩合生成紫红色化合物而使氨基酸斑点显色。 （三）相对迁移率—Rf值的计算 混合氨基酸被分离后在薄层层析图谱上