低阶煤生物转化进展概述.doc

简述：褐煤处于煤化作用的初级阶段，是远古植物残体未经高温高压的成岩作用而产生的黑褐色有机矿物质，因此其机构疏松，孔隙结构复杂，含氧官能团多，水分高，发热量低，易于自燃，其次灰分也较高，这些特点严重的制约了褐煤的开发利用。然而正是由于褐煤处于煤化作用的初级阶段，使得褐煤仍然保留有植物组织的部分特征，宏观方面，结构疏松，孔隙发达等；微观方面，分子结构聚合度低、支链发达、含氧官能团多，氢含量高。褐煤分子结构不存在植物组织中木质素的结构单体（三种芳香单体），而是由结构各异的带有支链的芳香结构通过脂肪链、脂肪环、二硫键等相连，但其分子组成与木质素类似，都含有大量芳香酸、酚类结构，褐煤中的这类结构复杂多样的物质统称为腐殖酸。腐殖酸的存在为能够降解木质素的微生物（某些真菌、放线菌和细菌）转化褐煤（分解、液化和气化）提供了理论基础，科研工作者致力于利用生物的方法使煤炭转变为清洁燃料、化工原料以及一些有特殊价值的化学品，形成了煤加工利用新的研究方向，因而选育煤炭的高效降解菌种、制定最优的预处理工艺就成为其重点。 一、中国煤的生物转化实验研究 张明旭，徐敬尧 实验目的：通过对球红假单胞菌和黄孢原毛平革菌的紫外诱导，获得高效的褐煤降解菌株突变株，并对突变株的褐煤降解能力、降解后褐煤的结构进行检测，分析降解前后煤样分子结构的变化。 实验步骤： 1、褐煤的预处理：用浓度为5N的硝酸浸泡煤样二天，用旋片式真空泵过滤，用蒸馏水清洗，直至滤液pH值接近7为止，烘干、消毒，并检测原煤样和酸洗后煤样水分、灰分、挥发分和硫分。 2、菌种及菌悬液制备：菌种：球红假单胞菌和黄孢原毛平革菌；菌悬液制备：选取部分培养l天的液体培养的球红假单胞菌进行稀释至106／mL，均匀涂布于无菌固体培养基平皿的表面，以备辐射诱变处理后计算致死率对比时用，再制备若干实验用平板以供诱变实验使用。取28℃培养5d的试管斜面黄孢原毛平革菌，加10mL生理盐水，用灭菌的接种环刮下孢子，置于盛有玻璃珠的三角瓶中，28℃、200r／min充分振荡5h，以打开孢子团，使孢子充分分散和活化，诱变处理时将孢子浓度稀释至106／mL，即为单菌落悬浮液 3、紫外诱导：将紫外灯(30W)打开，预热20min，取5mL菌液放在直径为9cm的无菌培养皿中，将培养皿置旋转嘲盘(33r／rain)上，并使其距离紫外灯30cm处。对球红假单胞菌处理时间梯度为：10s，20s，30s，40s，60s．对黄孢原毛平革菌处理时间梯度为：20s，40s，80s，120s，160s，200s，250s，300s。紫外照射后，暗修复2h，以免引起细菌的光修复。 4、初筛复筛：对紫外诱导后的菌悬液进行涂布培养，平板上透明圈直径和菌落直径的挑取比值大的菌株进行褐煤降解实验。 5、褐煤降解：在若干个250ml锥形瓶中均加入100ml液体培养基，并高压灭菌，在加入一定量的煤样置于恒温振荡培养箱中，振荡1h后置1d，调整pH值在7．0左右，然后加入培养24 h的黄孢原毛平革菌和球红假单胞菌菌液10mL／100mL；于28℃、150 r／min下恒温振荡培养若10d，过滤、离心。对离心的上清液加酸(碱)出现絮状沉淀，过滤，沉淀物在70C烘干，称重，计算煤的转化降解率。 6、褐煤降解率： M0—加入的煤样质量（g）；M1—煤降解后的残煤质量（g）； η—煤降解率(%) 7、分别对残液酸沉淀物、残液碱沉淀物、残煤以及氧化褐煤进行FTIR检测，分析并对照集中物质的大分子结构骨架参数，比较之间的差异。 实验结果：1、紫外诱导后，黄孢原毛平革菌对义马原褐煤的降解率从31．84％提高到37．6％，硝酸处理义马褐煤的降解率从32．55％提高到51．62％；球红假单胞菌对义马原褐煤的降解率从7．82％提高到38．32％，硝酸处理义马褐煤的降解率从21．23％提高到41．31％。2、煤微生物转化产物进行了FTIR分析，结果表明微生物转化后的水溶性物质也是一种复杂的混合物，其芳香聚合度、分子量有很大程度的降低，官能团含量发生了变化，其中酚羟类、羟基类、羰基类物质有所增加。 二、云芝对光氧化预处理神府煤的生物转化 王永娟，李 慧 实验目的：以云芝为实验菌种，神府煤为煤样，考察光氧化预处理对煤生物降解的影响，并对残煤以及残液的元素、结构进行检测，分析元素以及结构变化。 实验步骤： 煤样制备与预处理：煤样破碎后在球磨机中球磨1 h，得到粒度D9011um的试验煤样．将试验煤样经95％酒精灭菌后，于105 ℃真空干燥2 h后备用。在自制的光氧化装置上，将真空干燥好的神府超细煤样(YM)于60℃，氧气流量30 mL／min，紫外灯管功率160 W的条件下氧化处理26 h．光催化氧化结束后，将光氧化煤样(GYM)保存在样品瓶中备用．氧气及氨气混合气氛(氧气流量为30 mL／m