葛根素心肌保护，调节血脂与舒血管的药理作用机制.pdfVIP

中圄协中医科．太学髑l士掌位论文 中文摘要 l葛根素对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌损伤绗保护作用 在我国，葛根素，葛根中提取的主要异黄酮活性物质，被广泛用在心血管疾 病的临床治疗上。尤其对心肌梗塞有显著疗效。然而，其中的药理作用机制还不 是很清楚。研究表明环氧酶一2(cox一2)和一氧化氮(NO)在心肌梗塞中起 着重要的作用。我们猜想葛根素的心脏保护功能可能与C0x．2和一氧化氮合酶 mg／l(g，d)来建立急性心肌损伤模型。治疗组大鼠在注射异丙肾上腺素之前和同时 注射异丙肾上腺素“小时后，通过II导联心电图，血清乳酸脱氢酶(LDH)， 磷酸激酶(cK)活性，脂质过氧化物MDA的含量和心室／体重指数来判断心肌 损伤与否。通过蛋白印迹或荧光定量RT—PcR来检测左心室Nos，炎症介导因 予C0x．2和肿瘤坏死因子(TNF．a)以及心肌纤维化相关蛋白胶原蛋白I，胶 原蛋白III，纤连蛋白和层粘连蛋白的表达水平。结果发现，异丙肾上腺素模型组 死亡率很高，存活大鼠的ST段显著上抬，血清LDH和CK活性，MDA含量以 及心室，体重指数均增加，而葛根素治疗组死亡率显著降低，sT段，LDH和cK， MDA以及心室，体重指数都趋于正常。进一步研究发现，异丙肾上腺素模型组内 皮一氧化氮合酶(eNOS)和神经一氧化氮合酶(nNOS)的表达水平显著降低， 诱导型一氧化氮合酶(iNOs)的表达水平显著增加；炎症介导因子，COX．2和 TNF-Ⅱ的mRNA水平显著增加；对于心肌纤维化相关蛋白，尽管胶原蛋白I， 胶原蛋白ⅡI的mRNA水平没有显著性改变，但纤连蛋白的层粘连蛋白的mRNA 水平显著升高。 值得注意的是，葛根素能够阻止eNOs表达水平的下降，并能 够下调cOX2和n呼m纤连蛋白和层粘连蛋白的表达水平。综上，葛根素能 够有效防止异丙肾上腺素诱导的心肌损伤。这种心肌保护功能可能与其上调 eNOS表达水平和，或抵抗炎症反应有关。对于葛根素抗炎的相关机制还有待于 进一步的研究。 进一步的研究。 中圈协和医科大掌悄吒b掌位-沧文 2葛根素对大鼠膳食诱导的高胆固酵血症的血脂调节作用 高胆固醇血症是动脉粥样硬化发生和发展的主要危险因子之一。研究表明， 许多天然产物在降低血清胆固醇，延缓心血管疾病进程方面有显著疗效。多年来， 葛根被广泛用作降血脂治疗药物。当前的研究旨在观察葛根中主要的活性物质， 葛根素的调节血脂，防止动脉粥样硬化发生的药理作用。我们检测了，正常对照 组，膳食诱导的高胆固醇血症模型组，葛根素治疗组(300mg／kg／dayp．o．)的大 鼠血脂水平以及胆固醇平衡相关酶基因水平的变化。葛根素显著抑制了高胆固醇 膳食诱导的血清、肝脏总胆固醇和动脉粥样硬化发生指数的升高，与高胆固醇模 型组相比较，葛根素治疗组大鼠肝脏的7伍．羟化酶(CYP7A1)的mRNA水平 显著增加，而对羟基．3．甲基戊二酰CoA还原酶(}IMGR)，羊毛固醇14洳去甲 基酶(cYP51)的mRNA水平没有影响。为了进一步观察葛根素抗动脉粥样硬 化作用，我们检测了试验组大鼠的胸主动脉乙酰胆碱诱导的内皮依赖舒张反应和 内皮一氧化氮合酶(eNOs)表达水平。结果发现。尽管各组大鼠之间的内皮依赖 舒张反应没有显著差异，但是高胆固酵膳食使得eNos蛋白表达水平降低，而葛 根素能够有效抑制这种降低。综上，葛根素能够降低胆固醇诱发的动脉粥样硬化 发生危险。其作用机制可能是通过上调7Q．羟化酶(cYP7A1)的表达水平，促 进胆固醇向胆酸转化。对于葛根素是否直接影响胆固醇平衡或者同时影响胆固醇 平衡和内皮功能还有待于进一步的研究。 3葛根素对大鼠胸主动脉的舒张作用及其机制 从葛根素在心血管疾病的临床治疗作用，推测葛根素可能具有舒血管作用。 我们的研究旨在观察葛根素的舒血管作用以及深入阐明其机制。结果表明葛根素 (3，15和45pM)剂量依赖地抑制了内皮完整胸主动脉对苯肾上腺素或KCl的收 缩反应，而不影响对caCl2的收缩反应。进一步研究发现葛根素不能够影响苯肾 上腺素(1斗M)诱导的胞内钙的释放，不能舒张苯肾上腺素或Kcl预收缩的胸主动 脉。体内给予葛根索(30mgm∥‘lay，100m∥Wday，300mg，l(∥day，i．p．)试验表明， 对照组和正常组胸主动脉的苯肾上腺素或Kcl量一效蓝线没有显著性差异。胸 主动脉环与 L-NAME ester)TEA