非洲猪瘟病毒P单克隆抗体的制备及抗体检测方法的建立.解读.ppt

非洲猪瘟病毒P72蛋白单克隆抗体的制备及抗体检测方法的建立 研究生：朱 红 导 师：孙怀昌 教授 研究背景 是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起猪的一种急性、热性、高致死性的传染病。 强毒株感染的发病率和死亡率可达100%，OIE将其列为国际A类疾病。 在非洲国家广泛流行。 无有效疫苗进行防治。 研究背景 形态特征（图1） 复制方式：胞浆内 分类：非洲猪瘟病毒科 是唯一一种DNA虫媒病毒 研究背景 VP72 参与病毒吸附和进入细胞的四种主要蛋白之一。 占病毒粒子蛋白的32%，是一种非常保守的抗原性蛋白,对自然感染具有免疫原性。 是血清学检测的理想抗原。 研究背景 常规实验室诊断技术 血吸附试验 敏感猪接种试验 PCR 免疫荧光 ELISA 研究目的及意义 诊断的意义 目前尚无理想的疫苗对非洲猪瘟进行预防。 抗体诊断的目的 发病猪产生的IgG抗体在体内能持续很长时间，特别适用于亚急性和慢性病例的检出。 单克隆抗体的优势 特异性强 高效，灵敏，便捷，成本低 研究内容一 非洲猪瘟病毒P72单抗的制备 技 术 路 线 免疫原的制备 检测用抗原的制备 筛 选 结果 筛选到五株阳性克隆，命名为3E9、3E11、4A8、4H2、6E5。 单克隆抗体的效价测定 结论：细胞上清效价在27~212之间，腹水效价可达216。 单克隆抗体的亚类鉴定 单克隆抗体的抗原识别 间接ELISA