第四DNA的复制分析.ppt

基因信息的传递 本 篇 主 要 内 容 复制（replication） 基因表达 （gene expression) 基因表达调控 第四章 DNA的复制 复制 (replication) ——由亲代DNA合成两个相同的子代 DNA的过程。 定义：由亲代DNA生成子代DNA时，每个新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式称半保留复制。 中国科学院上海生化与细胞所2002年招收硕士研究生分子遗传学入学考试： 请设计一个实验来证明DNA复制是以半保留方式进行的（8分）。 实验证据（1958 Meselson 和Stahl） DNA半保留复制的生物学意义： DNA的半保留复制表明DNA在代谢上的稳定性，保证亲代的遗传信息稳定地传递给后代。 4.1.2 双向复制 双向复制 复制时，DNA从起始点（origin）向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制（bidirectional replication）。 DNA双螺旋的两条链是反平行的，而DNA合成的方向只能是5’→3’ 。 在DNA复制时，1条链的合成方向和复制叉的前进方向相同，可以连续复制，叫作前导链（leading strand）；而另一条链的合成方向和复制叉的前进方向正好相反，不能连续复制，只能分成几个片段（冈崎片段）合成，称之为滞后链（lagging strand）。 领头链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。 原核生物中的DNA聚合酶(大肠杆菌） 真核生物的DNA聚合酶 DNA－pol α，β，γ，δ，ε。 DNA－po1δ：延长领头链和随从链； DNA—poIα：合成RNA引物； DNA－polε：校读、修复和填补缺口。 DNA—polβ：在没有其他DNA－pol时，发挥催化功能。 DNA—po1γ：催化线粒体DNA的合成。 与复制起始及解链相关的酶类及蛋白 DnaA蛋白 DnaB蛋白（解螺旋酶） DnaC蛋白 DNA的半不连续复制（semi-discontinuous replication) DNA复制时其中一条子链的合成是连续的，而另一条子链的合成是不连续的，故称半不连续复制。 华中科技大学2004年生物化学与分子生物学硕士研究生入学试题 原核DNA合成酶中（ ）的主要功能是合成前导链和冈崎片段 A、DNA聚合酶Ⅰ B、DNA聚合酶Ⅱ C、DNA聚合酶Ⅲ D、引物酶 Contents 端粒和端粒酶介绍 端粒酶的作用机制 端粒与衰老的关系？ 4.4.2 DNA复制的其它方式 滚环型： 单向复制的特殊方式 如：ΦΧ174的双链环状DNA复制型（RF） D环复制 本章要点 大肠杆菌的复制原点 DNA复制的高度忠实性依赖的三种机制 原核生物中的DNA聚合酶(大肠杆菌） 原核复制起始蛋白 原核复制的起始过程 端粒与端粒酶 逆转录酶与逆转录过程、应用 4.4 逆转录和其他复制方式 Reverse Transcription and Other DNA Replication Ways 4.4.1 逆转录病毒和逆转录酶 逆转录 逆转录酶(reverse transcriptase) 逆转录酶 逆转录 在逆转录酶的作用下以RNA为模板合成DNA的过程。此过程中，核酸合成与转录（DNA→RNA）过程遗传信息的流动方向相反（RNA→DNA），故称为逆转录（reverse transcription) 。 逆转录病毒 RNA病毒的基因组是RNA而不是DNA，其复制方式是逆转录，故称为逆转录病毒（retrovirus）。 RNA病毒感染活细胞后，要先经逆转录成为双链DNA，通过基因重组方式，参加入宿主细胞基因组，并随宿主细胞复制和表达。这种重组方式称为整合（integration）。 病毒基因的整合可能是病毒致癌的重要方式。 逆转录酶 能催化以单链RNA为模板合成双链DNA的反应的酶称为逆转录酶（reverse transcriptase)。 它兼有三种酶的活性：RNA指导的DNA聚合酶，DNA指导的DNA聚合酶和RNase H活性。 所谓RNase H活性是指除去杂合分子中的RNA。它可以从5’→3’和3’→5’两个方向水解DNA－RNA。 逆转录酶和其他DNA聚合酶一样，合成DNA的方向为5’→3’，并且不能从头合成DNA，也需要引物，是病毒本身的一种tRNA。 逆转录过程 以单链RNA的基因组为模板，在逆转录酶(RNA指导的DNA聚合酶)的催化下，合成一条单链DNA； 产物与模板生成RNA∶DNA杂化双链，杂化双链中的RNA被逆转录酶(RNase H)水解； 以新