第四酶(LB)分析.pptVIP

酶的发展历史 酶的发展历史 德国Buchner兄弟用酵母提取液完成了发酵 酶的发展历史 Blake对溶菌酶结晶进行X-射线衍射分析 一、酶促反应的特点 二、酶促反应的机制 酶促反应动力学 概念 研究各种因素对酶促反应速度的影 响，并加以定量的阐述 一、底物浓度对反应速度的影响 单底物、单产物反应 酶促反应速度一般用单位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示 反应速度取其初速度，即底物的消耗量很小（一般在5﹪以内）时的反应速度 底物浓度远远大于酶浓度 (一)米－曼氏方程式 (二)Km与Vm的意义 2. Vm Vm是酶完全被底物饱和时的反应速度 二、 酶浓度对反应速度的影响 三、温度对反应速度的影响 四、pH对反应速度的影响 五、抑制剂对反应速度的影响 可逆性抑制作用 （reversible inhibition) （一）不可逆性抑制作用 乐果、1605、敌百虫 机理：与酶活性直接相关 的 丝氨酸上的羟基 牢固地结合 作用：强烈抑制神经传导 递质胆碱酯酶的活 性，使乙酰胆碱不 能被分解成乙酸和 胆碱，引起乙酰胆 碱的积累，使神经 处于过度兴奋状态 （二）可逆性抑制作用 1. 竞争性抑制作用 三种可逆性抑制作用的特征曲线 六、激活剂对反应速度的影响 非必需激活剂 变构效应剂 (allosteric effector) 三、同工酶(isoenzme) 催化相同的化学反应,酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。 (2)重金属离子 如Hg2+、Ag+、As3+ SH Cl S E + As-CH=CHCl E As-CH=CHCl + 2HCl SH Cl S 巯基酶 路易士气 失活的酶 路易士气的危害 S E Hg + S COONa CHSH CHSH COONa SH E + Hg SH COONa CHS CHS COONa 二巯基丁二酸钠 S CH2OH SH CH2OH E As-CH=CHCl + CHSH E + CHS S CH2SH SH CH2S As-CH=CHCl 二巯基丙醇 (BAL) 解毒方法： 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶活性降低或消失 概念 类型 竞争性抑制作用 (competitive inhibition) 非竞争性抑制作用 (non-competitive inhibition) 反竞争性抑制作用 (uncompetitive inhibition) 抑制剂与酶的底物结构相似，可与底物竞争酶的活性中心，阻碍酶与底物结合形成中间产物 E + S ES E + P + I EI Ki 底物、竞争性抑制剂与酶的结合部位 S S E E I I E E + P 无 I 有 I 竞争性抑制的底物浓度曲线 v 竞争性抑制作用过程 [S] ＣＯＯＨ ＣＯＯＨ │ │ ＣＨ2 或 ＣＨ2 │ │ ＣＯＯＨ Ｃ＝Ｏ 丙二酸 │ ＣＯＯＨ 草酰乙酸 举 例 ＣＯＯＨ │ ＣＨ2 琥珀酸脱氢酶 │ ＨＣ－ＣＯＯＨ ＣＨ2 │ ＨＯＯＣ－ＣＨ ＣＯＯＨ 琥珀酸