生物选修三基础知识汇总.docVIP

1、基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 2、基因工程的基本工具限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体（常见的是质粒） 3、限制性核酸内切酶的功能：能够识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定位点将两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。切割时不能破坏目的基因、标记基因。 4、DNA连接酶的作用是连接两个双链DNA片段形成磷酸二酯键 ； 6、基因工程的基本操作程序是：①目的基因的获取 ②基因表达载体的构建 ③将目的基因导入受体细胞 ④目的基因的检测与鉴定 7、获取目的基因的方法有：（1）从自然界中已有的物种中分离。（2）人工合成（常用方法有逆转录法（提取目的基因mRNA)_和化学合成法_）。 可从基因文库中获取或利用PCR技术扩增目的基因。 9、基因工程的核心是基因表达载体的构建（限制酶+DNA连接酶处理质粒和目的基因）。 基因表达载体的组成是：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因+复制原点。 标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 常用的标记基因是抗生素抗性基因（培养基中加入抗生素进行筛选）。 目的基因与标记基因一般不是同一种基因。 11、（1）将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法（Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞的染色体），其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。受体细胞若是体细胞，还要利用植物组织培养技术。 2）将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 显微注射技术。受体细胞是 受精卵（具有全能性）。 （3）将目的基因导入微生物细胞：钙离子处理，使细胞成为感受态细胞。 12、目的基因的检测与鉴定：①首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。 ②其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用分子杂交技术。（①②都用基因探针：放射性同位素标忘掉目的基因的单链。 原理都是碱基互补配对） ③最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质，方法是抗原－抗体杂交。 以上都是观察有没有杂交带。 有时还需进行 个体水平的鉴定，即接种实验（即用病原体感染或用虫子吃）。 意义（优势）：定向改造生物的遗传性状 14、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。 基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程生产的蛋白质是自然界不存在的。 15、植物组织培养技术原理：前者原理是植物细胞的全能性； 植物体细胞杂交技术原理是：细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 ★植物细胞全能性实现的条件：离体、一定的营养物质、植物激素、适宜的外界条件。 16、植物组织培养技术(无菌操作) 过程：离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 胚状体、丛芽等 ―→植物体。 20、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中到10代（原代培养）→出现接触抑制的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养到50代左右绝大多数细胞死亡，少数成为无限增殖的细胞系（癌变特征）。 原理：细胞增殖 21、动物细胞培养需要满足以下条件： ①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 ②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。 ③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：7.2～7.4。 ④气体环境：95%空气＋5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 22、动物体细胞核移植技术中选用去核卵(母)细胞做受体细胞的原因：含有使细胞核表达全能性的物质 原理：细胞核的全能性。 24、植物体细胞杂交的意义：克服了远缘杂交的不亲和的障碍。 25、单克隆抗体的制备中必须事先对小鼠注射特定抗原，使其产生浆细胞（B淋巴细胞），然后与骨髓瘤细胞融合；需要经过两次筛选，第一次用选择性培养基，选出杂交瘤细胞，第二次需要进行克隆化培养和抗体检测，选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 26、（1）杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。 （2）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。 27、精卵结合首先发生的是顶体反应 防止多精入卵的的两道屏障：透明带反应，卵黄膜封闭作用 判断受精的依据：透明带