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药品中梭菌的检测所用培养基实验
名称:哥伦比亚琼脂培养基
使用用途:
用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。
使用原理:
酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、可溶性淀粉提供碳氮源、维生素和生长因子;羊血是细菌生长繁殖的良好营养物质。在45~50℃的基础培养基中加入血液可以保存血液中某些不耐热的生长因子,同时血球不被破坏。庆大霉素能抑制肠杆菌科和铜绿假单胞菌的生长。 培养基配方(每升):
酪蛋白胰酶消化物10.0g
心胰酶消化物3.0g
玉米淀粉1.0g
肉胃酶消化物5.0g
酵母浸出粉5.0g
氯化钠5.0g
琼脂15.0g
最终pH7.3±0.2
培养基使用方法:
1、称取本培养基44.0g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,在45~50℃,每100.0毫升培养基加入5.0~10.0ml无菌脱纤维羊血,可配成血琼脂;如检测梭菌,每100ml培养基基础加入配套试剂1支(SR0160)(33.3mg/L硫酸庆大霉素),均匀,倾注平板。
2、接种菌株至平板上划线,35~37℃厌氧培养18~24小时;(药品)取培养物0.2ml涂抹于平板30~35℃厌氧培养48~72h。
3、观察结果。
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
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