试验一血红蛋白和血型的测定.docVIP

教 案 日期：2010年3月29—4月2日 教室：211 教学对象：09体教、社体、武术 第1次课 教学主题：实验一：血红蛋白和血型的测定 教学目标：1、学会测定血红蛋白的方法，并测出Hb值； 2、学会血型的测定。 教学重点：Hb测定方法及在运动训练实践中理论意义的理解。 教学难点：Hb在运动实践中的应用与评价 教　学　过　程　设　计 时间 （80分） 第一、引入内容：（10分钟左右） 复习理论课讲授的有关红细胞、Hb机能的基础知识，并讲解Hb在运动训练中评定训练强度、训练水平、选材中的应用作用。 第二、实验过程(65分钟) 一、讲解实验课原理 血红蛋白测定：本次实验选用用于目测比色的酸化法，即沙利氏比色法。其原理是在一定量血液中加入少许盐酸，酸不仅使红细胞膜破坏，而且使原来位于红细胞内的亚铁血红素转变成高铁血红素，后者呈交稳定的棕色。将其用蒸馏水稀释后与血红蛋白测定计的标准色进行目测比色，即得每100ml血液所含的血红蛋白克数或百分率。 血型测定：血型是根据存在于红细胞膜外表面的特异性抗原来决定的，根据存在红细胞上所含有的凝集原的种类，可将血型分为A、B、AB、O四种基本血型。 二、实验器材和实验对象 实验器材：沙利氏血红蛋白计、0.1mol/L盐酸溶液、一次性20ul定量毛细取血管、滴管、玻璃棒、75%酒精棉、血红蛋白仪、一次性采血针、试管及试管架、双凹片、一次性采血针、消毒牙签、碘酒棉球、A和B标准血清。 实验对象：人 三、实验步骤和注意事项 （一）、实验方法： 血红蛋白测定： 将标准比色管放在试管架上，加0.1mol/L 盐酸溶液20ul。 2、用一次性采血针刺破指尖，采血，血滴宜大些。用一次性毛细血管的尖端接触血滴，吸血至刻度20ul，加入比色管的盐酸液内，使盐酸与血细胞及其内部的血红蛋白充分混匀。 3、待5分钟后再一滴一滴加入蒸馏水搅拌，边滴边观察颜色，直至颜色与标准比色柱一致为止。 4、取出比色管凹面读数，记录血红蛋白的克数或浓度% 。 血型测定方法： 将已知的A型与B型标准血清各一滴滴在玻片两端，分别标明A 与B。 2、用75% 酒精棉球消毒指尖，以一次性采血针刺破皮肤。取1—2滴血，放入标有A与B玻片上，用牙签搅拌，使抗血清和血细胞悬液充分混合。 3、10分钟后用肉眼观察有无凝集现象，判断结果。 （二）、注意事项 血红蛋白的测定： ①采血点的确定及采血针的使用； ②毛细吸管的正确使用；将血液吹入比色管时勿造成气泡。 ③血液和盐酸作用的时间；血液与盐酸作用时间不可过短，否则Hb不能完全转化为高铁血红蛋白，使结果偏低。 ④比色管的放置； ⑤加蒸馏水时和读数时的注意事项； 使用血红蛋白仪测定仪： ①氰化高铁血红蛋白稀释液的作用及加的量； ②血液与氰化高铁血红蛋白稀释液的作用时间； ③血红蛋白仪器使用前的注意事项； ④血红蛋白仪使用后的处理； 血型测定： ①血清的滴定及标记方法； ②判断血型的方法； 血型测定结果如下： 第三：总结实验过程（5分钟左右） 课后小结：