第二十一章现代分析方法进展详解.pptVIP

现代分析方法进展 （四）在药物制剂分析中的应用 （五）在药物与蛋白质相互作用研究中的应用 （六）在药物杂质检查中的应用 （七）在中药分析中的应用 （八）在生物样本中的药物及其代谢产物分析中的应用 五、应用 毛细管电泳 1982年由美国国立卫生研究院（National Institutes of Health，NIH）的Yoichiro Ito博士研制开发的一种新型的、连续高效的液液分配色谱技术。 High-speed Countercurrent Chromatography 高速逆流色谱 与其它色谱技术不同的是它不需任何固态载体，因此能避免固相载体表面与样品发生反应而导致样品的污染、失活、变性和不可逆吸附等不良影响。 High-speed Countercurrent Chromatography 高速逆流色谱 液-液萃取 一、基本原理 高速逆流色谱 高速逆流色谱是建立在单向性流体动力平衡体系之上的一种逆流色谱分离方法，它是在研究旋转管的流体动力平衡时偶然发现的。 一、基本原理 高速逆流色谱 当螺旋管在慢速转动时，螺旋管中的两相都从一端分布到另一端。用某一相作移动相从一端向另一端洗脱时，另一相在螺旋管里的保留值大约50%，但这一保留量会随着移动相流速的增大而减小，使分离效率降低。 一、基本原理 高速逆流色谱 但使螺旋管的转速加快时，两相的分布发生变化。当转速达到临界范围时，两相就会沿螺旋管长度完全分开，其中一相全部占据首端的一段，我们称这一相为首端相，另一段全部占据尾端的一段，称为尾端相。 一、基本原理 高速逆流色谱 高速逆流色谱正是利用了两相的这种单向性分布特征，在高的螺旋管转动速下，如果从尾端送入首端相，它将穿过尾端相而移向首端，同样，如果从首端相送入尾相，它将穿过首端相而移向螺旋管的尾端。 一、基本原理 高速逆流色谱 分离时，在螺旋管内首先注入其中的一相（固定相），然后从合适的一端泵入移动相，让它载着样品在螺旋管中无限次的分配。仪器转速越快，固定相保留越多，分离效果越好，且大大地提高了分离速度，故称高速逆流色谱。 一、基本原理 高速逆流色谱 1．逆流色谱不用固态支撑体，完全排除了支撑体对样品组分的吸附、玷染、变性、失活等不良影响。所以，能避免不可逆吸附所造成的溶质色谱峰拖尾现象，能实现很高的回收率。例如，对于黄酮等易被填料吸附的物质的分离与制备就具有明显的优势。 二、特点 高速逆流色谱 2．逆流色谱的分配分离是在旋转运动中完成的，两相溶剂都被剧烈振动的离心力场依其界面特征形成极微小的颗粒，样品各组分会在两相微粒的极大表面上分配，并且能在颗粒振荡与对流的环境中有效地传递。所以，它就象是把通常的溶剂萃取过程成千上万次地、高效地、自动连续地予以完成。 二、特点 高速逆流色谱 3．没有填料在柱内的占空体积，逆流色谱的柱内空间全部是有效空间。所以，它的样品负载能力很强，制备量很大，而且重现性很好。 二、特点 高速逆流色谱 三、仪器 高速逆流色谱 Separation and purification of natural bioactive molecules Separation and purification of synthesized compounds Fingerprint and quality control research of Traditional Chinese Medicine Separation and purification of antibiotics Separation and purification of proteins and polypeptides Chiral separation 四、应用 高速逆流色谱 This new category of analytical separation science retains the practicality and principles of HPLC while increasing the overall interrelated attributes of speed, sensitivity and resolution. Ultra Performance Liquid Chromatography 超高效液相色谱 van Deemter equation：H=A+B/u+Cu H=a(bp)+b/u+c(dp)2u 颗粒度越小柱效越高； 每个颗粒度尺寸有自己的最佳柱效的流速； 更小的颗粒度使最高柱效点向更高流速（线速度）方向移动，而且有更宽的线速度范围。 一、原理 超高效液相色谱 降低颗粒度不但提高柱效，同时也提