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第7课时 动物细胞培养和核移植技术
[目标导读] 1.结合教材图2-16及相关内容,归纳动物细胞培养的过程、条件及应用。2.结合教材图2-21,归纳通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。3.简述体细胞核移植技术的应用前景。
[重难点击] 1.动物细胞培养的过程及条件。2.动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
1.一般来说,已分化的植物细胞整体具有全能性,而已分化的动物细胞整体的全能性受到限制,只是细胞核具有全能性。
2.癌细胞的主要特征有无限增殖、形态结构改变、易分散转移和接触抑制丧失的特征。
3.器官移植面临的问题之一是排斥反应,这与人体内的T淋巴细胞有关。
4.克隆(英语:Clone)在广义上是指利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组之后代的过程。在园艺学上,克隆是指通过营养生殖产生的单一植株的后代,很多植物都是通过克隆这样的无性生殖方式从单一植株获得大量的子代个体。在生物学上,是指选择性地复制出一段DNA序列(分子克隆)、细胞(细胞克隆)或是个体(个体克隆)。
[课堂导入]
如图为克隆动物明星—“多利”,它是科学家运用动物细胞核移植技术培育的,今天我们就来学习动物细胞工程的有关内容。
探究点一 动物细胞培养
动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。观察下图,探讨动物细胞培养的相关问题。
1.过程
取动物组织块
分散组织细胞:剪碎,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间
制成细胞悬液
原代培养:具有贴壁生长和接触抑制的特点
传代培养
(1)动物细胞培养时选用什么样的动物组织块好(幼嫩的还是衰老的),为什么?动物细胞培养的原理是什么?
答案 幼嫩的,因为幼嫩组织块容易增殖。细胞增殖。
(2)将组织分散成单个细胞的方法是什么?为什么要先剪碎组织?
答案 方法是从健康动物体内取出组织块,剪碎,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间,这样组织就会分散成单个细胞。先剪碎组织的目的是增大胰蛋白酶或胶原蛋白酶与细胞的接触面积。
(3)如何区分原代培养与传代培养?
答案 ①原代培养:通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。②传代培养:贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞增殖,即为传代培养。
2.条件
(1)无菌、无毒的环境:即对培养液和所有培养用具进行无菌处理。
(2)营养:合成培养基的成分为糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清、血浆等。与植物组织培养基比较,动物细胞培养基的独特之处:①液体培养基;②其成分中有动物血清。
(3)温度和pH:适宜的温度为36.5±0.5_℃;pH为7.2~7.4。
(4)气体环境:进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。
3.应用
(1)生产有重要价值的生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。
(2)为皮肤大面积烧伤病人培养供移植的皮肤。
(3)用于检测有毒物质。
(4)科学家培养各种正常或病变的细胞,用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据。
小贴士 ?1?细胞株和细胞系
①细胞株:传代培养的细胞一般传到10代左右就不易传下去,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。但是有极少数细胞能度过“危机”而继续传下去,这些存活的细胞一般能传到40~50代,这种传代的细胞叫做细胞株。
②细胞系:当细胞株传至50代以后又会出现“危机”,不能再传下去。但有部分细胞的遗传物质发生了改变,而且带有癌变的特点,获得不死性,可在培养条件下无限制地传代下去,这种传代的细胞称为细胞系。
?2?癌变的细胞无接触抑制现象,可以堆叠起来增殖。
?3?用胰蛋白酶处理组织块,可使细胞分散开,目的是使细胞与培养液充分接触。不能使用胃蛋白酶分散细胞,因为多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,此pH下胃蛋白酶不具活性。
归纳提炼
活学活用
1.判断下面关于动物细胞培养的叙述的正误。
(1)动物细胞培养的原理是动物细胞的全能性( )
(2)需要对细胞进行一次脱分化处理和两次蛋白酶处理( )
(3)原代培养的细胞是指从贴壁生长到发生接触抑制的细胞( )
(4)恒温条件下,细胞周期持续时间长短不随细胞培养进程而改变( )
(5)传代培养的细胞因为以有丝分裂方式增殖,所以在传代过程中其遗传物质保持不变( )
(6)只要培养条件适宜,细胞都可在体外无限繁殖( )
(7)可用于检测有毒物质、构建人造皮肤、大量生产药物蛋白( )
(8)为了防止培养过程中发生微生物污染,应将培养箱抽成真空以消毒、灭菌( )
答案 (1)× (2)× (3)× (4)× (5)× (6)× (7)√ (8
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