凝集反应(听课)概要.ppt

概述 二、分类 直接凝集反应 定义： 直接用颗粒性抗原与抗体结合，出现肉眼可见的凝集现象。 特点： * 抗原呈颗粒状，制成的液体为悬液 * 抗原颗粒相对比抗体大,形成的凝集物主要成分为抗原 * 抗原的比表面积比抗体小，试验时为使抗体不过剩， 通常稀释抗体 * 以出现凝集现象的抗体最高稀释度判断效价 一、玻片凝集试验 ABO血型鉴定 实验原理 标准抗A血清 实验步骤 1、标记玻片：取洁净玻片一张，用笔在玻片两端分别标明 A B 3、消毒取血 用无菌棉签蘸取消毒液，消毒左手无名指指腹皮肤，用消毒采血针垂直刺入消毒皮肤处取血各一滴分别涂于玻片的标准抗A血清和标准抗B血清中，分别用牙签将其混匀 结果判断 试管凝集试验 定量抗原（已知） 间接凝集试验 正向间接凝集 用抗原致敏载体--检测抗体 反向间接凝集试验 用抗体致敏载体----检测抗原 间接凝集抑制试验 用抗原致敏载体--检测抗原 妊娠免疫诊断试验 孕妇尿中，绒毛膜促性腺激素（HCG）含量明显增高。（HCG是可溶性抗原 ） 反之，非孕妇尿中HCG含量甚微，不足以消耗掉抗HCG抗体。 实验材料 1、标本： 孕妇尿（HCG阳性）、待检尿、 正常尿 ２、试剂： 兔抗人HCG血清、HCG致敏的乳胶颗粒 ３、器材： 载玻片、滴管、玻棒 五、实验结果 待检尿 若出现白色细小凝集为妊娠诊断试验阴性 若呈均匀浑浊乳状液为妊娠诊断试验阳性。 间接凝集试验 小结 凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原的颗粒性载体与相应抗体结合后，可出现肉眼可见的凝集现象。 可以分为直接凝集反应、间接凝集反应和抗人球蛋白试验 小结 作业 1、何为凝集反应？凝集反应有哪些类型？ 2、请解释直接凝集试验、正向间接凝集试验、反向间接凝集试验和间接凝集抑制试验的原理？ * 一、定义 凝集反应是指颗粒性抗原（细菌、红细胞）或附着在载体上的可溶性抗原(或抗体)与相应的抗体（或抗原）在适量的电解质存在的条件下，经一定时间后凝聚成肉眼可见的凝集物。 参加反应的抗原称为凝集原,抗体称为凝集素。 凝 集 反 应 玻片凝集试验 直接凝集反应 抗人球蛋白凝集试验 间接凝集反应 试管凝集试验 正向间接凝集试验 反向间接凝集试验 间接凝集抑制试验 直接法 间接法 （coombs试验） 已知抗体 未知抗原 （待检标本） ? + 凝集团块 混浊 YES NO O抗原（菌体抗原） 致密的颗粒状凝集物 O凝集 H抗原 （鞭毛抗原） 疏松的絮状凝集物 H凝集 Vi抗原 （表面抗原）致密的颗粒状凝集物 Vi凝集 血 型 系 统 含抗Ａ凝集素 使Ａ型、AB型红细胞的凝集原凝集 含抗Ｂ凝集素 使Ｂ型、AB型红细胞的凝集原凝集 标准抗B血清 B A 2、滴加血请：在玻片A B两端分别滴加标准抗A 和抗B血清各一滴。 抗A抗体 抗B抗体 4、观察结果 静置10—15分钟后用肉眼观察有无 凝集现象。 A型 标准抗A血清 标准抗Ｂ血清 根据有无凝集现象判定血型 B型 AB型 O型 方法评价: 定性试验 简便和快速 敏感度低 临床应用: 菌种鉴定 血清学分型 血型鉴定 + 系列稀释抗体（待检血清） 不同程度的凝集反应（阳性） 确定抗体的滴度(凝集效价) 实验材料： 伤寒杆菌O菌液、 待测血清、生理盐水 2. 方法： 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 0.5 弃掉 1 2 3 4 5 0.1 6 0.9 生理盐水(ml) 待测血清 对照管 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml ① ② ③ ④ 伤寒杆菌O菌液 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 抗体稀释度 彻底混匀 56℃, 1h 4. 预期结果 + 很小的凝集颗粒 混浊 - 无凝集现象 与对照相同 ++ 小、部分凝集块 中等混浊 +++ 大多凝集管底 轻度混浊 ++++ 大的凝集块 清亮 凝集程度 沉淀 上清 管底沉淀 凝集程度 最高稀释比例 待测血清的滴度 方法评价： 半定量试验 简便、快速 敏感度低 临床应用： 肥达试验 外斐试验 布鲁菌病 交叉配血试验 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象 间 接 凝 集 反 应 载体不同 反应方式不同 正向间接凝集试验 反向间接凝集试验 间接凝集抑制试验 协同凝集试验 红细胞凝集试验 胶乳凝集试验 分类 间接乳凝试验检测类风湿因子 间接