4-2基因结构和重组.pptVIP

不校正 A-C C-A A-C，T-G G-T，C-A A-C，C-A 双链断裂起始重组模型（DSBR模型）（P129） 在酵母系统的重组研究中，发现载体DNA双链断裂可大大提高同源重组的效率。 受体双链产生断裂 断裂处扩展成带有3’端单链的缺口 游离3’端侵入供体双链，形 成D环；游离3’端延伸，取 代了供体的一条链 供体的D环与受体的3’端配 对；受体的另一3’端也进行 修复合成 分支点的移动产生了带有 两个重组连接点的分子 转座子 1951年McClintock提出转座（Transposition）和跳跃基因(jumping gene)的概念 1967年Shapiro才在E.coli中发现了转座因子（transposable element） McClintock 转座子 一段DNA序列可以从原位上单独复制或断裂下来，环化后插入另一位点，并对其后的基因起调控作用，此过程称转座，这段序列称为跳跃基因或转座子。 玉米粒颜色的遗传 正常：有色 ? 有色 异常：有色 ? 色斑 有色 ? 无色 玉米色粒调控元件 Ac-Ds系统 第9染色体 C基因， 色素合成基因。 Ac基因，自主移动的调节因子， 编码转座酶，并支配受体因子移动。 Ds基因， 非自主移动的受体因子，不产生蛋白质。插入引起色素不能合成。 C Ac 有色 C Ds 无色 C Ds Ac色斑 原核转座因子的类型 1、插入序列(IS)（两端有略长的IR和短的DR） 2、转座子： 简单转座子，如Tn3（两端具有IR而不是IS ） 复合转座子，如Tn10（两端组件为IS） 注：IR，反向重复序列；DR，正向重复序列。 插入序列(insertion sequence, IS) 仅含有转座酶基因的简单转移序列。长度多在700－1500bp左右。 由末端反向重复序列(IR)，转座酶基因组成。 插入基因组中时，在靶位上生成正向重复序列(DR) 反向重复序列：在同一多核苷酸链内下游存在着与上游某一段序列的互补序列反向的序列。如图一GTGCTAA和TTAGCAC构成反向重复序列。在双链DNA中反向重复可能引起十字形结构的形成。 常见的IS结构 IS 长度 末端IR 靶位DR 插入选择 IS1 768 23 9 随机 IS10 1329 22 9 TNAGCN IS50 1531 9 9 热点 （三）转座类型 类型 (1) 复制型转座 （replicative transposition） (2) 非复制型转座 （nonreplicative transposition） (3) 保守转座(附加体) （conservative tranposition） * 基因结构和重组 一、一基因一酶学说 1941 Beadle Tatum 提出： “ one gene one enzyme” hypothesis Supplements Mutant strain Nothing Ornithine Citrulline Arginino- Arginine Growth response if nutrient is added to minimal medium succinate Wildtype Arg+ + + + + + Arg-E- - + + + + Arg-F-