分子生物学-1复制.ppt

DNA dependent DNA polymerase——DDDP DNA dependent RNA polymerase——DDRP RNA dependent RNA polymerase——RDRP RNA dependent DNA polymerase——RDDP DNA复制的概况 原核生物的DNA复制 真核生物的DNA复制 1.Replicons（复制子） Replicon is any piece of DNA which replicates as a single unit. It contains an origin and sometimes a terminus Prokaryotic genome: a single replicon Eukaryotic genome: multiple replicons Replication fork（复制叉） is the point at which strands of parental duplex DNA are separated so that replication can proceed. The direction of Replication 2.The model of Replication Mathew Meselson Franklin Stahl dNTP: dATP, dGTP, dCTP, dTTP template Primer Other proteins and Enzymes Template 切开双链DNA中的一条链，链的切口末端就可转动，使DNA变成松驰状态，然后再将切口封闭， 连环数减少一个, 作用时不消耗ATP。 可同时切开超螺旋的两条链 改变2个连环数 需要ATP提供能量， 使双螺旋DNA两条链分开。 水解ATP获得能量, 与单链DNA结合，防止单链DNA重新形成双螺旋， 防止单链DNA被核酸酶降解。 2.primase(引物酶) 5 to 3 elongation (polymerase activity) 3 to 5 exonuclease (proof-reading activity) 5 to 3 exonuclease (repair activity) 有5′→3′聚合酶活性，以带有缺口的双链DNA为模板。 有3′→5′核酸外切酶活性，没有5′→3′核酸外切酶的活性。 可能主要用于DNA的修复。 有5′→3′聚合酶活性 有3′→5′核酸外切酶活性，没有5′→3′核酸外切酶的活性。 原核细胞DNA复制的主要酶。 1999年才被发现， 涉及DNA的错误倾向修复， 当DNA受到严重损伤时，即可诱导产生这两种酶，使修复缺乏准确性，因而出现高的突变率。 双链的解开 RNA引物的合成 DNA链的延长 切除引物，填补缺口，连接相邻的DNA片断 切除和修复错配碱基。 OriC 包含11个GATC，它是甲基化的靶序列，在腺嘌呤的N6位置被甲基化。 真核生物DNA比原核DNA大得多，且与组蛋白结合成核小体 原核生物只有1个复制起始点，而真核生物有许多复制起始点。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 原核生物复制起点可连续复制，而真核生物在全部完成复制之前起点不再重新开始复制。 它在核中的存在先于复制。 一轮复制将这个因子失活或破坏，另一轮复制就不能再发生，直到提供给更多的因子。 细胞质中的因子只有在有丝分裂期间的核膜破裂时才能进入核中。 原核生物每时每刻都在复制，而真核生物的DNA在S期复制。 20世纪30年代，Barbava McClintock和Hermann J.Muller发现，染色体的末端有一种能稳定染色体结构和功能的特殊成分。 一种含RNA的逆转录酶。 含有RNA组分和蛋白质组分，均为酶活性所必需。 以RNA为模板，合成端粒DNA。 一、DNA复制概况 概念（※） ： Replicon、 replication bubbles、 Replication fork、 semi-coservative replication、 semi-discontinuocos replication、 Okazaki fragment、 leading strand、 lagging strand 复制子： origin、 terminus、 replication bubbles、 Replication fork、 the direction of Replication 复制模型： θ replication、 Rolling cicle replication、 D loops replication 半保留复制、半不连续复制（※） 复制机制： 复制过程需要的蛋白质