【创新大课堂】2016届高三生物一轮复习人教版课件 选修1 第4讲 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取 .pptVIP

考点·全线突破 考点一　DNA的粗提取与分离 [关键点击] 1．DNA与蛋白质在NaCl溶液中溶解度 2.鉴定方法 (1)DNA与二苯胺在沸水浴条件下反应呈蓝色； (2)蛋白质与双缩脲试剂常温下反应呈紫色。 3．DNA粗提取实验材料和方法的选择 (1)不同生物的组织中DNA含量不同 在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。 (2)材料不同所采用的提取方法不同 ①植物组织：取材→研磨→过滤→沉淀。 ②鸡血：制备鸡血细胞液→提取核DNA→溶解细胞核内DNA→析出并滤取DNA→DNA再溶解→提取较纯净的DNA。 4．DNA粗提取实验中注意的问题 (1)DNA的粗提取的关键：提取DNA时DNA和蛋白质的溶解与析出是相反的，实验时一定要明确DNA分子的去向，防止误将DNA分子丢弃。 (2)2次加蒸馏水的作用：①加入鸡血细胞液，使血细胞吸水涨破；②加入含DNA的2 mol/L NaCl溶液，使其稀释，从而析出DNA。 (3)3次使用纱布的作用：①过滤血细胞破裂液，提取细胞核物质(DNA在滤液中)；②过滤0.14 mol/L NaCl溶液，滤出DNA(DNA在黏稠物中)；③过滤溶有DNA的2 mol/L NaCl溶液(DNA在滤液中)。 (4)3次使用NaCl溶液的作用：①2 mol/L NaCl溶液，溶解提取细胞核物质；②0.14 mol/L NaCl溶液，使DNA析出；③2 mol/L NaCl溶液，溶解滤取的DNA黏稠物。 考点二　 PCR技术的基本操作和应用 [关键点击] 1．PCR相关技术原理与条件 (1)PCR：多聚酶链式反应的简称，是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。 (2)引物：是一小段RNA或单链DNA，它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。 (3)扩增方向：DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 2．细胞内DNA复制与PCR技术 3.PCR的反应过程 (1)变性：当温度上升到90 ℃以上时，双链DNA解聚为单链，如下图： (2)复性：温度下降到50 ℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，如下图： (3)延伸：温度上升到72 ℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，如下图： 考点三　血红蛋白的提取和分离 [关键点击] 1．常用的蛋白质分离方法 (1)凝胶色谱法 (2)电泳法原理： ①在一定pH下，蛋白质分子的某些基团解离后带上正电或负电，在电场的作用下，带电分子会向着与所带电荷相反的电极移动。 ②由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。 2．分离DNA和蛋白质比较 考点四　植物有效成分的提取 [关键点击] 1．三种提取方法 2.三种植物有效成分提取 考情·随堂体验 考情一　DNA的粗提取与分离 1．下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是(　　) A．利用DNA溶于酒精，而蛋白质不溶于酒精，可将DNA与蛋白质分离 B．利用高温能使蛋白质变性，却对DNA没有影响的特性，可将DNA与蛋白质分离 C．在溶有DNA的物质的量浓度为2 mol/L的氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水，轻轻搅拌后过滤，取滤液进行以后的实验 D．在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可将DNA与蛋白质分离 解析　利用DNA不溶于酒精，而蛋白质溶于酒精，可将DNA和蛋白质分开。温度过高也会影响DNA的特性，如PCR技术。在物质的量浓度为2 mol/L的氯化钠溶液中DNA溶解度最大，但加入蒸馏水后，DNA溶解度降低，DNA析出，过滤后应取其黏稠物进行以后的实验。蛋白酶能分解蛋白质，而不能分解DNA。 答案　D 2．下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是(　　) A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取 D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少 解析　提取植物细胞中DNA时加入洗涤剂可瓦解植物细胞膜，利于DNA的释放，但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度，A项错误；含DNA的丝状物应先溶解在物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺试剂在沸水浴条件下检测，冷却后变成蓝色，B项错误；菜花匀浆中含有DNA水解酶，常温下其活性较高，可催化DNA水解从而影响DNA的提取，C项正确；用玻棒缓慢搅拌滤液不使DNA分子断裂，就不会影响DNA的提取量，D项错误。 答案　C 考情二　PCR技术的基本操作和应用 3．复旦大学的研究人员正在进行一项利用DNA技术在全国曹姓家族中寻找曹操后裔的研究。该研究中最不可能