河北省邯郸一中高二人教版生物选修一导学案：专题4课题3 酵母细胞的固定化 .docVIP

专题4课题3 酵母细胞的固定化 课题背景 1、问题：酶对环境条件敏感，易失活；溶液中的酶很难回收，不能再次利用，提高了生产成本；反应后的酶会混合在产物中，如不除去，会影响产品质量。 设想：将酶固定在 的 上。 优点：使酶既能与反应物 ，又能与产物 ，同时，固定在载体上的酶还可以 。 2、问题：一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能得到的。 设想：将合成酶的 直接固定。 优点：成本 ，操作 。 一、基础知识 （一）固定化酶的应用实例 1、高果糖浆是指 含量为 左右的糖浆，能将葡萄糖转化为果糖的酶是 。 2、使用固定化酶技术，将这种酶固定在一种 的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多 的筛板。酶颗粒无法通过筛板的小孔，而反应溶液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的 注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与 接触，转化成果糖，从反应柱的 流出。反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。 （二）固定化细胞技术 1、固定化酶和固定化细胞是利用 或 方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括 、 和 。 2、一般来说，酶更适合采用 和 固定，而细胞多采用 固定化。这是因为细胞体积比酶分子的体积大；体积大的细胞难以被 或 ，而个小的酶容易从包埋材料中 。 3、包埋法法固定化细胞，即将微生物细胞 包埋在不溶于水的 的载体中。常用的载体有 、 、 、 和 等。 二、实验操作 （一）制备固定化酵母细胞 1．酵母细胞的活化 活化就是处于 状态的微生物重新恢复正常的生活状态。 2．配制物质的量的浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液 3．配制海藻酸钠溶液 加热溶化海藻酸钠时要注意 加热， 几次，并不断 ，直到海藻酸钠 为止。如果加热太快，海藻酸钠会发生 。 4．海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合 将海藻酸钠溶液冷却至 ，加入已活化的海藻酸钠溶液，进行充分搅拌，使其混合 ，在转移至 。 （二）用固定化酵母细胞发酵 1．将固定好的酵母细胞（凝胶珠）用蒸馏水冲洗2-3次。 2．将10%葡萄糖溶液转移至锥形瓶中，加入固定好的酵母细胞，置于 ℃下发酵 （时间）。 三、结果分析与评价 （一）观察凝胶珠的颜色和形状 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说，制作失败，需要再作尝试。 （二）观察发酵的葡萄糖溶液 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多，同时会闻到练习1.答：直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的优缺点如下表所示。 类型 优点 不足 直接使用酶 催化，、等。 对环境条件非常，容易；溶液中的酶，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能。 固定化酶 酶既能，又能，同时，固定在载体上的酶还可以被。 一种酶只能催化化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。 固定化细胞 成本，操作。 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近，可能导致等。 3.提示：可以从酶的结构的多样性，对理化条件的敏感程度等角度思考。酵母细胞的活化。在缺水的状态下，微生物会处于状态。活化就是让处于休眠状态的微生物。酵母细胞所需要的活化时间较短，一般需要0.5～1 h，教师需要提前做好准备。此外，酵母细胞活化时体积会变大，因此活化前应该选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器外是操作中最重要的一环，涉及到实验的成败，教师一定要提醒学生按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。刚形成的凝胶珠应在中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的