丛枝菌根中的真菌脂质几丁寡糖共生信号.pptVIP

Page ? * Page ? * Fungal lipochitooligosaccharide symbiotic signals in arbuscular mycorrhiza （丛枝菌根中的真菌脂质几丁寡糖共生信号） 期刊介绍 NATURE卷: 469 期: 7328 页: 58-U1501 DOI: 10.1038/nature09622 出版年: JAN 6 2011 出版商 NATURE PUBLISHING GROUP, MACMILLAN BUILDING, 4 CRINAN ST, LONDON N1 9XW, ENGLAND 研究方向:Science Technology - Other Topics 类别:Multidisciplinary Sciences 文献类型:Article 语种:English 入藏号: WOS:000285921600030 PubMed ID:ISSN: 0028-0836 背景介绍 丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza, AM)真菌是一类古老的微生物, 其与植物共生的历史可追溯到4.6亿年前。AM是陆生生物与古门球囊菌门真菌之间的一种根内共生。与AM真菌共生能促进植物水分、养分的吸收, 增强植物对生物及非生物胁迫的抗性; 作为回报, 共生植物反馈AM真菌碳水化合物, 以帮助真菌完成生活史。 人们对AM真菌与植物共生关系的研究已跨越百年。目前, 绝大多数研究集中于共生关系形成之后, 而调控植物与真菌共生关系形成的相关信号物质研究较少。 最近有证据表明AM真菌能产生一些可扩散的信号。 本文将说明Glomus intraradices（丛枝菌根真菌）能分泌使生成AM的混合的硫酸盐和非硫酸盐的lipochitooligosaccharides (LCOs脂质几丁寡糖)生物共生信号。 而在豆科Medicago truncatula（苜蓿）植物中，这些信号能通过DMI信号通路刺激根系的生长和分支化。 背景介绍 实验对象 1.活性确定对象： a:the Vicia sativa root-hair branching assay (VsHab豌豆根毛分支法),它能检测不同类型的非硫酸盐化的LCOs。 b：包含早期节瘤基因MtENOD11启动因子区域和GUS受体基因的Medicago truncatula（苜蓿）转基因株(ENOD11法)。它能检测不同类型的硫酸盐化LCOs. c:Medicago truncatula分支根系，用于Myc信号的检测。 2.分离对象： a：G. intraradices侵染的胡萝卜根的无菌分泌物 b；无AM菌感染的胡萝卜根无菌分泌物 c:G. intraradices的发芽孢子提取物（GSE） 实验部分——G. intraradices 分泌 LCOs 用正丁醇和乙酸乙酯对G. intraradices侵染的胡萝卜根的无菌分泌物进行提取。 提取物用HPLC初步分离。分离物中部分A（F4、F5）（40%乙腈洗脱得到）检测到对ENOD11有生物活性，部分B（F9、F10）（60%乙腈洗脱得到）检测到对VsHab有生物活性。 并且2个部分都能促进苜蓿根的分支化，说明AM真菌能分泌可传播的因子。 实验部分——G. intraradices 分泌 LCOs 将部分A、B做UPLC/Q-ToF MS谱。 部分A在负离子电喷雾模式下，有12个硫酸盐化LCOs的分子离子拥有m/z 值，其中6个分子离子（m/z 值为 1,105.5,1,103.5, 1,101.5, 1,133.5, 1,131.5, 1,129.5）对应于硫酸盐化的四聚体LCOs (LCO-IV, S)，被拥有0、1、2个不保护度的C16或C18脂肪酸链N-酰化。另外6个分子离子（m/z 值为1,308.6, 1,306.6, 1,304.6, 1,336.6, 1,334.6 and 1,332.6)对应于硫酸盐化的五聚体LCOs (LCO-IV, S)被同样的酰基链酰化。 实验部分——G. intraradices 分泌 LCOs 为确定这些分子离子结构所做的UPLC/Q-ToF MS谱。得到了LOCs的代表性片段。 实验部分——G. intraradices 分泌 LCOs 部分B在正离子模式下，检测到非硫酸盐化的LCO-IV(C16:0) 和 LCO-IV(C18:1)。 在F1到F3中，我们没有检测到亲水性的LOCs,在F6到F8中，也没有检测到疏水性的LOCs。 所以在菌根根中存在分泌物中存在硫酸盐化与非硫酸盐化的LCOs混合样品。 在同样培养条件下的无AM菌感染的胡萝卜根无菌分泌