蛋白质的生物合成说课.pptVIP

原核生物和真核生物翻译起始过程的比较： 共同点： 1）核糖体小亚基结合荷载的起始tRNA； 2）在mRNA上必须找到合适的起始密码子； 3）大亚基必须与已经形成复合物的小亚基、起始tRNA、mRNA结合。这些过程中都需要非核糖体的可溶性起始因子参与。 不同点：（除前面的3点外，第4点可分成下述两点） 1）在原核细胞中，mRNA首先与小亚基结合，才有起始tRNA加入形成起始复合物；而真核细胞中，起始tRNA首先结合于小亚基，形成复合物后，再在多种因子参与下结合mRNA，才形成大的起始复合物； 2）小亚基起始复合物在mRNA上寻找起始密码子的方式不同。原核细胞内，依靠小亚基内16S rRNA 3’端序列与SD序列互补结合，才定位于mRNA。而真核细胞内，依靠5’帽子结构的起始因子结合小亚基，然后以滑动搜索机制寻找起始AUG。 生成起始复合物，第一个氨基酸（fMet/Met-tRNA）与核糖体结合以后，肽链开始伸长。按照mRNA模板密码子的排列，氨基酸通过新生肽键的方式被有序地结合上去。肽链延伸由许多循环组成，每加一个氨基酸就是一个循环，每个循环包括AA-tRNA与核糖体结合（进位）、肽键的生成和移位。 3 翻译的延伸 起始复合物形成以后， 1）第二个AA-tRNA在延伸因子EF-Tu及GTP的作用下，生成AA-tRNA·EF-Tu·GTP复合物，然后结合到核糖体的A位上。 2）这时GTP被水解释放，通过延伸因子EF-Ts再生GTP，形成EF-Tu·GTP复合物，进入新一轮循环。 1）后续AA-tRNA与核糖体结合（进位） 模板上的密码子决定了哪种AA-tRNA能被结合到A位上。由于EF-Tu只能与fMet-tRNA以外的其他AA-tRNA起反应，所以起始tRNA不会被结合到A位上，这就是mRNA内部的AUG不会被起始tRNA读出，肽链中间不会出现甲酰甲硫氨酸的原因。 在真核系统中，进位需EF-1因子，该因子可与结合有氨酰-tRNA和GTP的核糖体形成延伸四元复合物，同时偶联GTP的水解。EF-1是多亚基蛋白质，分为EF-1α, EF-1β,EF-1γ，具备了EF-Tu及EF-Ts的性质。 经过上一步反应后，在核糖体·mRNA·AA-tRNA复合物中，AA-tRNA占据A位，fMet-tRNAfMet占据P位。P位和A位上各结合了一个氨基酰tRNA，两个氨基酸之间在核糖体转肽酶作用下，P位上的氨基酸提供α-COOH基，与A位上的氨基酸的α-NH2形成肽键，从而使P位上的氨基酸连接到A位氨基酸的氨基上，这就是转肽 2）肽键的生成(转肽) E位 fMet 转肽 是转肽酶催化的肽键形成的过程 3）移位??? 肽键延伸过程中最后一步反应是移位，即核糖体向mRNA 3‘ 端方向移动一个密码子。 此时，仍与第二个密码子相结合的二肽基tRNA从A位进入P位，去氨基酰-tRNA被挤入E位，mRNA上的第三位密码子则对应于A位。EF-G是移位所必须的蛋白质因子，移位的能量来自另一分子GTP水解。 用嘌呤霉素作为抑制剂做实验表明，核糖体沿mRNA移动与肽基-tRNA的移位这两个过程是耦联的。 核糖体上一般存在三个与 -tRNA结合的位点，即A位点（aminoacyl site），P位点（peptidyl site）和E位点（Exit site）。只有fMet-tRNAfMet能与第一个P位点相结合，其它所有tRNA都必须通过A位点到达P位点，再由E位点离开核糖体。 进位 转肽 移位，脱落 翻译的延伸总结 ?? 肽链的延伸过程中，当终止密码子UAA、UAG或UGA出现在核糖体的A位时，没有相应的AA-tRNA能与之结合，而释放因子能识别这些密码子并与之结合，水解P位上多肽链与tRNA之间的二酯键。接着，新生的肽链和tRNA从核糖体上释放，核糖体大、小亚基解体，蛋白质合成结束。释放因子RF具有GTP酶活性，它催化GTP水解，使肽链与核糖体解离。 ??? 4 肽链的终止 原核细胞内存在三种不同的终止因子（或称释放因子，RF1，RF2，RF3）， RF1能识别UAG和UAA，RF2识别UGA和UAA。 一旦RF与终止密码相结合，它们就能诱导肽基转移酶把一个水分子而不是氨基酸加到延伸中的肽链上。RF3可能与核糖体的解体有关。 真核细胞只有一个（RF）终止因子。它可以识别三类终止密码子，研究发现，在大多数真核生物中，RF都有非常类似的肽链结构。 5.蛋白质合成抑制剂 ??? 蛋白质生物合成的抑制剂主要是一些抗生素，如嘌呤霉素、链霉素、四环素、氯霉素、红霉素等，此外，如5-甲基色氨酸、环已亚胺、白喉毒素、蓖麻蛋白等都能抑制蛋白质的合成。 抗菌素对蛋白质合成的作用： 1）阻止mRN