第一章-基因与基因工程分析.pptVIP

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生物技术专业核心课程-基因工程 2 DNA的分子结构及其特点 DNA碱基组成特点和规律 DNA的双螺旋结构(Watson-Crick模型) 增色效应(hyperchromic effect) 熔解温度(melting temperature, Tm) 复性在基因工程中的应用 显示不同生物体间的遗传相关性; 检测特定的DNA; 考查某些序列在特定生物体DNA中的拷贝数; 确定特定碱基序列在DNA中的位置; 分离克隆基因。 经典的基因概念:在染色体或DNA分子上, 基因是成串珠似的一个挨一个地排列着,它 们之间是由非遗传的物质连接起来。交换只 是在基因之间进行,而不是在基因内部发生。 1.有关基因工程的名词术语 4.基因工程的基本形式 真核基因的mRNA结构 真核基因的mRNA 5?端帽的结构 5?-UTR 3?端poly(A)尾巴 编码区 3?-UTR m7G5’ppp-NmpNp-…AUGCTT…CAACGGUAA… AAUAAA……AAAAAA… 5?端帽的结构 3?端poly(A)尾巴 5 基因的类型 1.根据产物类型分类 结构基因(Structural genes) 除了调节基因以外的编码任何RNA或蛋白质 产物的基因。 调节基因(Regulator genes) 其产物能够控制另外一个基因或若干基因表 达效率的基因。 例如大肠杆菌lac操纵子的laci基因,其编码 蛋白质能够控制lac操纵子结构基因的表达。 无诱导物时 葡萄糖(+), 乳糖(–) 结构基因表达关闭 2.根据表达特性 组成基因(Constitutive genes) 又叫做看家基因(Housekeeping gene),是一 类理论上在所有细胞类型中都能进行表达、并为 所有类型细胞生存提供必需的基本功能的基因。 诱导基因(Inducible genes) 因环境中某种特殊物质的存在而被诱导表达 的基因,叫做“诱导型基因”,简称“诱导基因”。 3.根据实验用途 选择基因(Selectable genes) 是指可使被转化的细胞获得其亲本细胞所不具 备的新的遗传特性,从而使得人们能够使用特定的 选择性培养基,将转化的新细胞从其亲本细胞群体 中选择出来的一类特殊的基因。 选择基因主要是一类编码可使抗菌素(诸如氨苄青霉素、潮霉素、链霉素、卡那霉素等)或除草剂失活的蛋白酶基因。 Amp选择培养基筛选 A. pBridge-GmMYBZ1 B. pBridge-GmMYBZ2 C. pBridge-GmMYBJ6 D. pBridge-GmMYBJ7 D A B C C A B D A.CK B. GmMYBZ2 C. GmMYBJ6 D. GmMYBJ7 报告基因(reporter gene) 特指其编码产物能被快速检测,常用来判断 外源基因是否已经成功地导入寄主细胞、器官或 组织的一类特殊的基因。 常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶(CAT)基 因,?-葡萄糖醛酸糖苷酶(GUS)基因,以及绿色荧 光蛋白(green fluorescent protein, GFP)基因。 promoter-GUS expression pattern subcellular localization of the OsAbc1-2 protein 3.根据结构特点 断裂基因(split gene) 编码序列不连续的间断基因,即在其核苷酸 序列中间插入了与氨基酸编码无关的DNA间隔区, 使一个基因分隔成若干个不连续的区段。 split gene 移动基因(movable gene) 又叫跳跃基因或转位因子,是指一种可以在 染色体基因组上移动,甚至在不同染色体之间、 噬菌体及质粒DNA之间跃迁的DNA短片段。 1951年由Barbara Mclintock(麦克林托克) 首次在玉米中发现了一种控制元件, 后 来这个元件被命名为转座元件或转座子。 由此,Barbara Mclintock在1983年获得了 诺贝尔奖。 特点: 不必借助同源序列就可移动的DNA片段,即转座作 用与供体和受体之间的序列无关。 转座序列可沿染色体移动,也可在不同染色体间跳 跃(又称之为跳跃基因)。 原核生物和真核生物均有转座子。 玉米转座因子对胚乳颜色的影响 紫色 无色 紫色斑点 ? 假基因(pseudogene)

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