I型超敏反应实验设计剖析.ppt

* IL-12抗I型超敏反应的实验探究 实验目的 1.验证IL-12对Th2型免疫应答向Th1型转换，下调IgE的作用。 2.探究IL-12的注射剂量对下调IgE的影响。 3.探讨IL-12在治疗I型超敏反应中的前景。 实验原理 IgE的产生依赖于细胞因子IL-4，Th2细胞受变应原刺激活化分泌IL-4等细胞因子,可诱导变应原特异性B细胞增殖、分化成浆细胞，通过调节Ig类别转换等机制产生特异性IgE抗体。 IL-12可刺激NK细胞分泌IFN-γ，并诱导Th0向Th1细胞方向分化，抑制向Th2细胞分化，减少Th2细胞以及其生成的IL-4。同时，IFN-γ还具有抑制B细胞合成IgE的潜在活性。从而可以达到下调IgE的效果。 IFN-γ是Th1的特征性细胞因子，IL-4是Th2的特征性细胞因子。利用酶联免疫吸附法（ELISA)检测致敏大鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-4的表达水平,以及血浆中IgE的水平。即可验证IL-12对Th2型免疫应答向Th1型转换，下调IgE的作用。 IL-12刺激Th2向Th1转化，下调IgE 实验原理 ELISA原理 双抗夹心法 测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的