microRNA说课.ppt

①在细胞核内转录出较长的初级miRNA（primary miRNA, pri-miRNA）； ②在核内由Drosha加工成60~70个核苷酸的发夹状RNA，即前体miRNA（miRNA precusor, pre-miRNA）； ③在Exprotin-5复合物的帮助下被转运出胞核； ④在胞浆中由Dicer（一种核糖核酸内切酶，属于RNase III家族中特异识别双链RNA的一员）剪切成为成熟miRNA； miRNA编码基因 1.基因簇多样性现象 miRNA的编码基因的转录与转录初产物的剪接 pri-miRNA MiRNAs具有高度的保守性、时序性和组织特异性。miRNAs的表达方式各不相同。 调控细胞生命程序的microRNA 调控细胞程序性死亡 调控细胞增殖 调控细胞周期 调控细胞分化和发育 调控细胞生命程序的microRNA miR-14和bantam是在果蝇细胞凋亡的调控中起重要作用的两种不同的miRNA: miR-14：研究表面miR-14的靶基因可能是Drice，在miR-14变异型的果蝇中，发现Drice的蛋白水平升高，从而能够调控细胞程序性死亡和脂肪代谢，因而miR-14是细胞程序性死亡的强抑制剂。其功能缺失会导致细胞大量死亡，其过量表达会抑制细胞死亡； Bantam：其靶基因是hid，hid编码的蛋白质能抑制细胞分裂增殖，从而导致细胞程序性死亡。其功能缺失会抑制细胞大量死亡，其过量表达会促进细胞程序性死亡。 MicroRNAs 可以起到肿瘤抑制基因和癌基因的作用 miR-34的表达可以影响到cyclin E2、CDK4（周期蛋白依赖激酶4）和c-MET（肝细胞生长因子受体）等的基因，从而诱导细胞衰老或增殖的过程，使细胞停滞在G1期。 Kanellpoulou的研究发现：不能合成miRNA的小鼠胚胎干细胞能够活下去，但是不能分化；而斑马鱼的生殖细胞不需要miRNA也能进行正常的生命活动并可以分裂产生新的生殖细胞。因此说明未分化的细胞可能不需要miRNA来维持其功能，但在多细胞生物的生长发育中起到非常重要的作用。 应用 基因功能分析 新型基因治疗方案 抗病毒疫苗的设计和研制 功能缺失转基因动物的建立 * Make by： pgp 暨南大学 讲解内容 1. 定义 microRNA (miRNA) 2. 来源 3.表达 4. 功能 讲解内容 1 定义 数字植物博物馆 1.1定义 MicroRNAs（miRNAs）是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其大小约为20~25个核苷酸。 定义 定义 来源 功能 讲解流程 表达 数字植物博物馆 1.2结构特征 ①广泛存在于真核生物中，是一组不编码蛋白质的短序列RNA，它本身不具有开放阅读框（ORF）； ②成熟的miRNA，5′端有一个磷酸基团，3′端为羟基，是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成，不同于siRNA（双链）但是和siRNA密切相关。 ③成熟的miRNA 5’端的磷酸基团和3′端羟基则是它与相同长度的功能RNA降解片段的区分标志。 定义 定义 来源 功能 讲解流程 表达 microRNA的结构特征 miRNA独有的特征：其5＇端第一个碱基对U有强烈的倾向性，而对G却有抗性，但第二到第四个碱基缺乏U，一般来讲，除第四个碱基外，其他位置碱基通常都缺乏C。 数字植物博物馆 1.3结构特征 定义 定义 来源 功能 讲解流程 表达 Pri-miRNA、Pre-RNA、microRNA的结构特征简图 2 来源 数字植物博物馆 2.miRNA的来源 来源 定义 来源 功能 讲解流程 表达 数字植物博物馆 2.1microRNA编码基因 定义 来源 功能 讲解流程 表达 在秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)中发现的一个miRNA基因簇的7个miRNA成员集中簇生在2号染色体的800 bp区域内, 并且7个成员之间形成旁系同源miRNA基因(图2) 2.在基因组中的位置： 内含子区域、基因间隔区 来源 ps： 1）约60%的microRNA为独立转录表达； 2）约15%miRNA为成簇存在而共同转录； 3）其余还有约25%的miRNA定位于功能基因内含子，随基因转录表达。 数字植物博物馆 2.2转录和剪接 定义 来源 功能 讲解流程 表达 1.转录： miRNA在RNA聚合酶Ⅱ/Ⅲ 的作用下转录成pri-miRNA 2.剪接： 转录产物pri-miRNA在5‘端加上7-甲基鸟苷酸帽子结构，在3’端加上polyA尾 数字植物博物馆 2.2转录和剪接 来源 定义 来源 功能 讲解流程 表达 ?(i)