紫外可见分光光度计的使用(自用)介绍.ppt

紫外可见分光光度计 主要内容 1、工作原理及仪器组成 2 、分光光度计的使用 　波长扫描 　定量测定 3 、注意事项 物质的颜色与吸收光的关系： 当白光照射到物质上时，如果物质对白光中某种颜色的光产生了选择性的吸收，则物质就会显示出一定的颜色。物质所显示的颜色是吸收光的互补色。 一、工作原理及仪器组成 利用一定频率的紫外--可见光照射分析物，它将有选择地被吸收。吸收光谱可以反映出物质的特征。 溶液对光的作用示意图 物质对光的选择性吸收－溶液对光的作用 I0 入射光辐射强度 I 透射光辐射强度 T 透射比 a 吸光系数 ε 摩尔吸光系数 光吸收遵循朗伯-比尔定律： 溶液对光吸收过程 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 仪器组成- 单光束分光光度计 双光束分光光度计 比值 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 光束分裂器 组成：光源、单色器、样品池、检测器 1．光源： 　　①能提供连续的辐射；②光强度足够大；③在整个光谱区内光谱强度不随波长有明显变化；④光谱范围宽；⑤使用寿命长，价格低。?钨灯——可见光区 320～2500nm 氢灯或氘灯——紫外光区 195－375nm U3010（碘钨灯、氘灯）波长范围190-900nm 2．单色器：包括狭缝、准直镜、色散元件 　　单色器是分光光度计的心脏部分，它的作用是把来自光源的混合光分解为单色光并能随意改变波长。它的主要组成部件和作用是： ①入射狭缝——限制杂散光进入。 ②色散元件——即棱镜或光栅，是核心部件，可将混合光分解为单色光。? ③准直镜——把来自入射狭缝的光束转化为平等光，并把来自色散元件的平等光聚焦于出射狭缝上。 ④出射狭缝——只让特定波长的光射出单色器。? 3. 吸收池 玻璃——由于吸收紫外UV光，仅适用于可见光区； 石英——适用于紫外和可见光区 4．检测器：将光信号转变为电信号的装置 光电管 光电倍增管 二极管阵列检测器 5．记录装置：讯号处理和显示系统 三 注意事项 1. 开机预热15分钟左右。 2. 测定时应注意： 参照池和吸收池应是一对经校正好的匹配的吸收池，材料和规格一致。 使用前后应将洗手池洗净，测量时不能用手接触窗口。 已匹配好的比色皿不能用炉子和火焰干燥，不能加热，以免引起光程长度上的改变。 3. 测量条件的选择： 选择适宜波长的入射光:由于有色物质对光有选择性吸收,为了使测定结果有较高的灵敏度,必须选择溶液最大吸收波长的入射光。 控制吸光度A的准确的读数范围:由朗伯-比耳定律可知,吸光度只有控制在0.2~0.7读数范围内时,测量的准确度较高. 选择参比溶液：参比溶液是用来调节仪器工作零点的。若样品溶液，试剂，显色剂无色可用蒸馏水作参比溶液；反之应采用不加显色剂的样品液作参比溶液。 4. 用完后先关程序，再关仪器开关，关电源，关闭计算机。 5. 正确登记，将仪器及实验台擦干净。