骨髓增生异常综合征文：MDS、AA和AL患者骨髓细胞周期及增殖特征的研究.docVIP

骨髓增生异常综合征论文：MDS、AA和AL患者骨髓细胞周期及增殖特征的研究 【中文摘要】检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome, MDS)、再生障碍性贫血(aplastic anemia, AA)和急性白血病(acute leukemia, AL)患者骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells, BMMNC)的细胞周期分布及CD34、Ki67抗原的表达。方法选取2009年6月至2010年6月在山东大学附属省立医院就诊的住院及门诊患者68例,MDS组30例,其中难治性贫血(refractory anemia, RA)组18例,难治性贫血伴原始细胞增多(refractory anemia with excess of blasts, RAEB)组12例；AA组22例,其中急性重型再障组7例,慢性非重型再障组15例；AL组16例,其中急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)组12例,急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)组4例。另外选取正常对照组18例(均为非血液病患者)。采用常规骨髓穿刺术,抽取骨髓各2ml；应用流式细胞仪(flow cytometry, FCM),通过碘化丙啶(propidium iodide, PI)细胞核染色及免疫荧光双标法,对其BMMNC的细胞周期分布及CD34、Ki67的表达进行检测。结果1.MDS和AL患者与正常对照组患者骨髓单个核细胞中细胞周期分布及增殖特征表达的比较与正常对照组相比,MDS组和AL组患者其BMMNC中细胞周期G0/G1期、造血干/祖细胞(haemopoietic stem cell, HSC)CD34细胞、Ki67+细胞、CD34+Ki67+细胞、CD34+细胞中Ki67+细胞和Ki67+细胞中CD34+细胞各自的比例均显著升高(P0.05),而CD34+细胞中Ki67+细胞比例显著降低(P0.05),且CD34+细胞、CD34+Ki67+细胞和Ki67+细胞中CD34+细胞比例均显著降低(P0.01)。4.AA患者和RA患者骨髓单个核细胞中细胞周期分布及增殖特征表达的比较与AA组相比,RA组BMMNC中G0/G1期、CD34+细胞、Ki67+细胞、CD34+Ki67+细胞、CD34+细胞中Ki67+细胞和Ki67+细胞中CD34+细胞比例均显著升高(P0.01),而RA组的S和S+G2/M期细胞比例均显著降低(P0.01)。结论1.MDS患者骨髓细胞G1期阻滞且伴有造血干/祖细胞的高增殖特性,可解释MDS患者骨髓细胞分化成熟障碍,在细胞形态学上可表现为病态造血,在临床上可表现为骨髓增生活跃而外周血细胞减少,支持MDS的本质是造血干/祖细胞的恶性克隆性疾病。2.MDS与AL患者骨髓细胞存在G1期阻滞的同时,都伴有造血干/祖细胞的高增殖特性。由RA进展到RAEB,再由RAEB进展到AL,BMMNC中CD34+细胞、CD34+细胞中Ki67+细胞比例均升高,G0/G1期细胞比例、Ki67+细胞比例亦升高,提示来源于造血干/祖细胞的恶性克隆性扩增逐渐获得优势而积聚,和/或其细胞本身质的缺陷越来越严重；MDS的不同发展阶段及其最终转化为急性白血病,从细胞周期理论及其增殖特征分析,它们之间并无质的差异,可能是同一疾病的不同发展阶段,支持MDS和AL具有相似的发病机制。3.与正常对照组相比,AA患者骨髓细胞的细胞周期分布差异无统计学意义,不支持AA是造血干/祖细胞恶性克隆性疾病,同时AA患者的造血干/祖细胞不仅数量减少,而且增殖活性减低,不同于MDS和AL患者。4.RA和AA患者相比,其骨髓细胞周期分布及增殖特性的表达差异均具有显著性意义,可用于二者的诊断及鉴别诊断,尤其是BMMNC中CD34+Ki67+细胞比例两者差异更大,用作本研究RA与AA的鉴别诊断指标准确率达100%。 【英文摘要】To explore the cell cycle distributions and the expressions of CD34 and Ki67, the cell proliferation-related protein in bone marrow mononuclear cells among myelodysplastic syndromes, aplastic anemia, and acute leukemia patients.METHODS Bone marrow aspirates were collected from 68 patients between June 2009 and June 2010 from the Depar