放射免疫技术ppt.pptVIP

一、免疫放射分析－基本原理 以过量125I标记抗体与待测抗原进行非竞争 性免疫结合反应, 用固相免疫吸附剂对B或F 进行分离，其灵敏度和可测范围均优于RIA 操作也较RIA简单。 单位点 IRMA 先用过量标记抗体与 待测抗原进行反应，形成 抗原抗体复合物；用固相 抗原结合未结合标记抗体 并将其分离, 测定上清液 的放射量 双位点 IRMA 先用固相抗体与抗原结 合，再用过量的标记 抗体与抗原的另一决定 簇结合，形成固相抗体- 抗原-标记抗体复合物， 洗弃剩余标记抗体，测固相上放射性。 与放射免疫分析不同，免疫放射分析采用固相吸附分离方法。免疫放射技术一般以塑料（聚苯乙烯）试管作为反应容器和固相吸附材料。聚苯乙烯能够吸附蛋白质（抗原或抗体）并保留原有结合抗原特性。当吸附特异性抗体与抗原发生反应时于固相材料表面形成复合物，未结合物质存在于液相中，将反应液弃掉并洗涤即可达到分离目的。 具有操作简便、省时、无需离心步骤等优点。 分离结合、游离标记物 对于双抗体夹心法，用已知浓度系列标准品抗原进行反应，以标准品抗原浓度为横坐标，结合部分（B）放射性计数为纵坐标，获得正向剂量反应曲线。 测量、数据处理 二、IRMA与RIA比较 放射免疫分析技术的灵敏度高、特异性强、精密度好, 常用于各种激素、微量蛋白质、肿瘤标志物和药物等微量物质的测定。但由于放射污染和危害，常用核素半衰期