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- 2016-07-01 发布于湖北
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3 基因组作图分析.ppt
遗传标记 是DNA水平上绘制现代遗传图谱的主要路标(landmark)。 采用遗传分析的方法将基因或其它DNA序列标定在染色体上,得到的线性排列图称为遗传连锁图,简称遗传图。 果蝇连锁图 Shotgun测序(1) 二、 物理图谱(physical map) 1.2 部分酶切法测定DNA片段位置 局限性: 随着DNA长度的增加和酶切位点的增多,单酶切、双酶切及部分酶切产生的条带数成比例扩大,需要对大量的片段进行比对和组装。虽可借助计算机,但是难免会产生一些大小非常接近的片段,导致电泳分辨困难。 限制性作图只能应用于较小的DNA分子,上限约50kb 染色体→酵母人工染色体(YAC)重叠群→ 筛选阳性YAC酶切→ cosmid人工染色体重叠群→阳性cosmid酶切→质粒亚克隆→限制酶作图 →计算机分析串联,获得大片段。 二、 物理图谱(physical map) 1.3 基因组限制性酶切作图的技术路线 即:基于克隆的基因组作图 YAC重叠群1000kb cosmid重叠群40kb 限制酶作图、测序分析 质粒亚 克隆 二、 物理图谱(physical map) + 5 3 2 8 5 2 1.3 基因组限制性酶切作图的技术路线 YAC载体是利用酿酒酵母的染色体的复制元件构建的载体。 YAC载体必须含有以下元件:①端粒重复序列(TEL) ②着丝粒(CEN)
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