3 基因表达检测分析.pptVIP

养成良好的实验习惯； 学会严谨的逻辑思维，分析推理的能力； 准确、精炼的表达自己的研究成果，善于和同行沟通和交流。 大家应该注意培养和锻炼的三方面能力： * 真核生物中有5.8S、18S、28S和5S四种rRNA，前三种rRNA为主体rRNA； 原核生物有5S、16S、23S三种rRNA 总RNA中80％－85％是核糖体RNA，剩余的15％－20％的为不同的相对低分子质量的RNA组成（如tRNA和小核RNA） mRNA占总RNA的1％－5％。 第三部分：基因表达检测 基因表达检测的应用范畴 检测自然变异等位基因的表达差异； 检测突变体基因功能的丧失或获得； 检测转基因的表达：OX 抑制 突变。 基因表达检测的技术手段 RT-PCR (Reverse transcription PCR) Real-time PCR=qRT-PCR Northern Blotting RT-PCR (qRT-PCR) RNA抽提 cDNA 反转录 基因特异性引导 Oligo(dT)引导 随机六核苷酸引物引导 PCR Northern Blotting 基因表达分析的一般流程 Northern Blotting Invented by Kary Mullis in 1983 and Awarded Nobel Prize for Chemistry in 1993 基因表达水平 mRNA 反