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第四章 中药制剂的含量测定 第一节 定量测定的目的与意义 含量测定是中药制剂质量控制的重要指标 测定对象：有效成分、指标成分、毒性成分 目的：判定药物的优劣，保证临床用药的安全、有效 注意点：与西药含量测定的区别 观点：指标成分 有效成分 单一成分 多指标成分/有效成分 第一节 定量测定样品的处理 样品处理的作用 充分释放被测成分 除杂纯化 富集浓缩或衍生化 使样品形式、溶剂符合测定要求 一. 样品的粉碎 样品粉碎的目的： 保证所取样品均匀且有代表性 较快且完全地提取被测成分 二. 样品的提取 冷浸法 适用：热不稳定的样品 方法：称取一定量样品置于带塞容器内，加入适量溶剂（样品量的10～50倍），称重，浸泡提取，浸泡时间12～24小时。浸泡后再称重，补足溶剂。 测定：部分测定法（等量法） 全部测定法（总量测定法） 优点：操作简单 缺点：费时、费溶剂、不易提取完全 回流提取法 适用：热稳定性的成分 方法：以单一溶剂或混合溶剂于水浴/电 热套加热回流提取 优点：提取效率比冷浸法高，提取时间短， 缺点：提取杂质较多 不宜用于热不稳定或挥发性的成分 连续回流提取法 （索氏提取） 适用：热稳定性的成分 方法：样品置索氏提取器中，用遇热可以 挥发的溶剂进行反复提取 优点：提取效率高，所需溶剂少 提取杂质少，操作简便 缺点：受热易分解的成分不宜使用 超声提取法 适用：热稳定性的成分 方法：样品置适当容器中，加入提取溶剂， 放入超声振荡器中提取。 优点：提取效率高，提取速度快，操作简便 注意：超声频率、提取时间、温度需考察 超临界流体提取法（SFE） 适用：主要用于热不稳定成分或挥发性成分， 也可热稳定性成分 主要用于非极性、弱极性化合物， 也可极性化合物——加入极性改性剂（甲 醇、氯仿、苯），增加其溶解能力。 方法：超临界流体萃取仪 优点：萃取效率高、速度快、准确度高、选择性较高、节省溶剂、易于自动化，可避免使用易燃，有毒的有机溶剂，并能与色谱和光谱等仪器联用。 二. 样品的分离净化 沉淀法 ：利用某些试剂与被测成分或杂质生成沉淀，分离沉淀或保留溶液的精制方法 蒸馏法 ：利用某些被测成分具有挥发性，采用蒸馏法，收集馏出液进行含量测定；或某些成分经蒸馏分解成挥发性成分，利用分解产物（要求结构明确）进行测定。 最常用：水蒸气蒸馏法 适用：挥发油，小分子生物碱 优化：蒸馏液中加入一定量无机盐（盐析作用），使挥发性成分更完全地蒸馏出来 液一液萃取法 ⒈ 直接萃取法 ：利用被测成分与干扰成分在有机溶剂（萃取剂）中的溶解度不同，通过多次萃取达到分离净化的目的。 萃取次数：实验考察（回收率符合） 溶剂的选择：根据被测组分疏水性的相对强弱 选择极性适当的溶剂 水相pH的控制：弱酸性成分 pH≤Ka-2 弱碱性成分 pH≥PKa+2 盐析作用：水相用NaCl饱和，提高提取率。 2.离子对萃取法 适用：高度离解的有机酸、有机碱 中药制剂分析主要用于生物碱（B） 离子对试剂：常为酸性染料（In-） 如：溴百里酚蓝（BTB）和溴甲酚绿（BCG） 注意：水相pH值的控制 离子对试剂的选择。 色谱法 最常用：经典微柱色谱（固相萃取、液—固萃取） 方法：将样品溶液加到装有合适固定相的色 谱柱中，将被测成分保留于柱上，洗去 杂质后，再洗脱被测成分进行测定。 或者：使杂质强烈保留于柱上，直接洗脱 被测成分进行测定。 适用于：总类成分的含量测定 进展：商品LSE柱作为GC、HPLC的预处理柱 LSE常用填料 ： ⒈ 硅胶、氧化铝等： 传统吸附剂 不极性吸附作用 氧化铝：用于生物碱、苷类等碱性、中性成分的 测定，吸附酸性成分 硅胶：适合于分离中性或酸性化合物，强烈保留 碱性化合物。 ⒉ 键合相硅胶： 十八烷基键合相硅胶（C18，ODS）、 C8 ——分离脂溶性杂质或成分 苯基、氰基键合相硅胶 ——分离水溶性杂质或成分 ⒊大孔树脂：分为极性和非极性型 ，D101最常用 注意：预处理；定量时回收率 ⒋聚酰胺： 氢键吸附——常用于含ph－OH的黄酮类成分 ⒌硅藻土、纤维素：亲水型填料，分配作用 流动相：与水不混溶的有机溶剂