第11-RNA的生物合成-转录重点.pptVIP

  第二节  RNA的生物合成-转录 ◆几个基本概念 结构基因(structure gene) 模板链(template strand) Watson(W)链、负(-)链(minus strand)、 反意义链(antisense strand) 编码链(coding strand) Crick(C)链、正(+)链(plus strand)、 有意义链(sense strand) 不对称转录(asymmetric transcription) 结构基因(structure gene)： DNA分子中能转录出RNA的区段。 模板链（反意义链）—— 以该链中的DNA碱基顺序指导RNA的合成即被转录的那条DNA链。 不对称转录  .DNA双链上，仅一股链转录，另一股不转录。 .有意义链与反意义链并非固定不变。 .转录方向都是5’ 3’ 二、参与转录的主要物质 1.模板 2.底物：ATP、GTP、CTP、UTP 3.辅助因子：Mg2+、Mn2+ 4.RNA聚合酶 5. 终止因子：识别终止信号。  （一）RNA聚合酶——依赖DNA的RNA聚合酶（DNA-dependent RNA polymerase,DDRP） 以DNA为模板，催化2个游离的NTP 形成3’，5’-磷酸二酯键 1、大肠杆菌RNA聚合酶的组成 （1）全酶(holoenzyme) 由4种(5个)亚基α2ββ’σ组成 （2）核心酶(core enzyme) α2ββ’ ，参与转录的全过程 （3）σ亚基（起始亚基） 亦称σ因子（σ factor)—转录辅助因子 识别启动子 ω亚基功能未知 亚基 α2 β β’ σ 全 酶 核 心 酶 二、RNA的转录过程：（以大肠杆菌为例） 转录的启动（起始位点的识别、转录起始） RNA链的延伸 转录终止 起始位点的识别 RNA合成过程 在DNA分子上（基因末端）提供转录停止信号的DNA序列称为终止子（terminators),它能使RNA聚合酶停止合成RNA并释放出RNA。 第一类： 依赖ρ-因子的终止 ρ-因子的作用 与新生RNA结合 ATP供能 ρ因子沿 新生的RNA单链推进 新生的RNA单链 从DNA模板上分离下来 DNA模板上有终止信号  转录出来的RNA Pol遇此结构停止工作 DNA和RNA（dA ：rU） 稳定性下降 富含GC/AT的回文结构 自身互补形成 发夹状结构（hairpin） 3’尾端有≥4个U DNA恢复双链， 释放转录产物 三、RNA的转录后加工 1、mRNA前体的加工 2、tRNA前体的加工 3.rRNA的转录后加工 1、mRNA前体的加工： （1）hnRNA被剪接 （2）3’端添加polyA “尾巴”； （3）5’端连接“帽子”结构（m7G5?ppp5?NmpNp-）； （4）分子内部的核苷酸甲基化修饰。 帽子结构 发夹结构 环 茎 多个U DNA模板 3’ 5’ UUGCAGCCUGAGAAAUCAGGCUGAUGG… 5’ 3’ … 5’ 3’ 自发形成发夹结构 （转录产物 3’末端） 例如： AUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUU 5’ 3’ UUUU…… 5’ 3’ 自发形成茎环结构 UUUU…… ….. 5’ 3’ 茎环结构改变RNA pol的结构，使其失活 茎环结构的形成使转录复合物趋于解体， Poly U加速这一过程 * * * 转录（transcription ） DNA携带的遗传信息传递给RNA的过程。 转录(transcription)： 以DNA单链为模板，NTP为原料，在DNA依赖的RNA聚合酶催化下合成RNA链的过程。 转录的条件： 模板 原料 酶 产物 配对 方向 引物 DNA(不对称转录） NTP RNA聚合酶 mRNA,tRNA,rRNA，小RNA A-U,T-A,G-C 5’ 3’ 不需要 DNA复制与转录的比较 相同点 模板 两股链均复制 模板链转录 合成方式 半保留复制 不对称转录 原 料 dNTP NTP 聚合酶 DNA聚合酶