15第十五章自身免疫性疾病的免疫学检验解说.pptVIP

结缔组织病(connective tissue disease,CTD) 是指病变主要发生于结缔组织，有组织黏液样水肿、纤维蛋白样变性及坏死性血管炎等基本病理变化的一组疾病。 以往所指的结缔组织病或胶原病是风湿性疾病的一部分，它们和风湿性疾病不可完全等同。 ANA主要是IgG，也有IgM、IgA、IgD和IgE； ANA无器官特异性和种属特异性； ANA主要存在于血清中； 将检出ANA作为AID存在的依据。 对风湿病有特异诊断价值的有以下七种： ①抗nRNP(nuclear RNP,nRNP)抗体； ②抗Sm抗体； ③抗SSA抗体； ④抗SSB抗体； ⑤抗Scl-70抗体； ⑥抗Jo-1抗体； ⑦抗核糖体抗体 。 用ELISA间接法检测抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。 抗核小体抗体（anti-nucleosome antibody，AnuA) 是细胞核染色质的基本单位; 细胞凋亡而致核小体大量蓄积， 诱导B细胞产生的AnuA是SLE 特异性的标志抗体。 抗dsDNA抗体 抗核小体抗体 抗dsDNA和抗Sm阴性的SLE阳性 率为60%～80%，特异性＞97%。 抗核小体抗体 20～30 RA 85～95 PSS 30 PM/DM ≥95 MCTD 70～80 SS ≥95 SLE ANA（%） 疾病 ANA（%） 疾病 常见AID的ANA阳性检出率 （二）ANA的检测方法 将患者血清先进行稀释，可以做定量试验，在1:80 稀释仍呈阳性时，对SLE的诊断有较大的参考价值。 形成胞核基质—ANA—抗人Ig · FITC 1.荧光免疫法 PSS、CREST综合征 抗着丝点 核浆细小相同颗粒荧光 着丝点型 PSS、雷诺现象、SLE 抗核仁抗体 核仁有荧光 核仁型 MCTD、SLE、PSS、SS、PM 抗ENA 核内颗粒状荧光 斑点型 SLE、RA、PSS、慢性肝病 抗DNA、AHA、 AnuA 核呈均质荧光 均质型 SLE、慢活肝炎 抗dsDNA 核周环状荧光 周边型 相关疾病 抗体 荧光图形 核型 抗核抗体核型与相关疾病 均质型 抗核抗体核型 着丝点型 核仁型 斑点型 例：间接免疫荧光法（IIF法） 测定抗dsDNA抗体 短膜虫的动基体内含有大量纯的 dsDNA，无其他抗原干扰，可用 作基质来测定抗dsDNA抗体。 短膜虫替换小鼠肝切片或肝印片或 Hep2，制成抗原基质—抗dsDNA—抗人IgG · FITC, 阳性结果可见鞭毛一端的动基体显示清晰的荧光。 测定抗dsDNA抗体具有特异性强、敏感性高的优点。 2. ELISA法 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 待检血清 按分子大小分开不同区带 分离 转印 NC膜上 抗ENA与膜上相应抗原带结合 抗人IgG·HRP NC—ENA—抗ENA—抗人IgG·HRP—显色 3. IBT法 类风湿因子(rheumatoid factor,RF): 是抗变性IgG的 自身抗体，为19S的IgM，也可见7S的IgG和IgA。 与人变性IgG结合，不与正常IgG发生凝集反应。 RF出现在类风湿性关节炎（RA）患者中，约70%～ 90%的血清中和约60%的滑膜液中可检出IgG类RF； 二、类风湿因子测定 IgG类抗体与相应抗原结合后，即发生变性； 在炎症过程中也可发生IgG变性，构成自身抗 原，刺激免疫系统产生各种抗IgG抗体； 滑膜液中的IgG类RF与变性IgG结合形成中等 大小的IC，比血清中IgM类RF更易致病。 （一）RF检测方法 1 RF检测最常采用的试验方法。 将IgG吸附在聚苯乙烯胶乳颗粒上作为诊断试剂，与待检血清中的RF结合，出现胶乳凝集颗粒。但此法的灵敏度和特异性均不高，而且只能检出血清中的IgM类RF。 间接胶乳凝集试验 2 将待检血清稀释成一定浓度，再加入定量变性IgG诊断试剂，立即用透射比浊或速率散射比浊仪测定血清中的RF。此法具有速度快、敏感性高（达ng/L水平）、精密度高（CV5%）、稳定性好、能定量分析的优点，但仍局限在IgM类RF的检测。 免疫比浊法 3 IgM、IgG和IgA类RF需要用RIA法或ELISA法等方法检测，但前者有放射性污染，故临床上多采用ELISA间接法或双抗原夹心法进行测定。 ELISA法 * 人民卫生出版社 第十五章 自身免疫性疾病的免疫学检验 * 一、 第十五章 自身免疫性疾病的免疫学检验 李 波　副教授佛山科技学院医学院 返回总目录 目　录 概述 1 自身