酶法分析(生科院2015)重点.pptVIP

（二）应用范围 1.有循环底物参加的酶反应的底物或酶可测定NAD、NADP、CoA等 2. 能与以上反应偶联的酶反应的底物或酶 可测定 “酶法分析”一章的要求 1 掌握终点法的测定原理，终点法的条件 2 使用终点法测定时应注意的问题 3 掌握通过测定辅酶变化量的单酶反应定量法（学会如何进行实验设计和分析） 4 掌握以脱氢酶为指示剂的偶联定量法（学会如何进行实验设计和分析） 5 掌握酶循环放大分析的原理和步骤 6 使用循环放大分析法时应注意的问题 7掌握循环放大分析法的应用（学会如何进行实验设计和分析） 反应速度法 辅酶的测定 抑制剂的测定 S E P 抑制剂 抑制剂的量与反应速度的下降值成正比 例：肝素的测定 RNA 小分子 RNAse 肝素 紫外有吸收 无 肝素的量与反应速度的下降值（V= ΔA/ Δt）成正比 标准曲线 样品的测定 管号 0 1 2 3 4 5 1 2 标准肝素溶液（ml） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 待测样品(ml) 1.0 1.0 H2O(ml) 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 1.0 1.0 RNA(ml) 1 1 1 1 1 1 1 1 RNAse(ml) 1 1 1 1 1 1 1 1 连续测定各管A300值，求出各管ΔA300=0.04所需的时间Δt Δt