第三章基因工程载体资料.pptVIP

5.根据基因工程的特殊要求加装特殊的基因元件 4、pUC质粒载体 1987年，J.Messing和J.Vieria采用MCS技术在pBR322基础上构建的 结构： （1）来自于pBR322的Ori （2）氨苄青霉素的抗性基因(ampr)。 但核苷酸序列发生了变化 （3） LacZ′基因 编码β—半乳糖酶的α—肽链 （4）MCS区段 与pBR322相比， pUC质粒载体优点： （1）具有更小的分子量和更高的拷贝数 如pUC8为2 750bp，pUCl8为2 686bp，控制质粒复制rop基因的缺失，平均每个细胞即可达500～700个拷贝 （2）适用于组织化学法检测重组体 通过?-互补作用，利用菌落颜色筛选重组子。而pBR322质粒的重组子要进行两步的选择。 （3）具有多克隆位点区段（MCS） 适合不同粘性末端的DNA片段插入，不必连接接头 第二节 噬菌体载体 一、大肠杆菌的λ-噬菌体DNA （2）功能相近的基因在基因组中聚集在一起 目前已经被确定的基因至少61种，一半为必需基因 （二）λ噬菌体载体的构建 1.选用λ噬菌体作为构建克隆载体材料的依据 是一种温和噬菌体。 能承载比较大的外源DNA片段 λDNA分子上有多种限制酶的识别位点 二.λ噬菌体载体的主要类型 （1）插入式载体 只具有一个可供外源DNA插入的限制酶位点的λ噬菌体。 常