微生物培养基的配制和灭菌.ppt.pptVIP

食品微生物学实验 实验一 微生物培养 基的配制和灭菌 实验二 放线菌和真 菌形态的观察 实 验 一 微生物培养基的配制和灭菌 一、实验目的 了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。 了解几种灭菌方法，，掌握干热灭菌法、加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。 （二）实验材料和试剂 药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、马铃薯、蔗糖；可溶性淀粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4?7H2O、FeSO4?7H2O 等。 仪器：高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、细菌过滤器、紫外线杀菌灯。 其它物品：天平、牛角匙、电炉、1N HCl、1N NaOH、pH试纸、刻度搪瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻棒、带玻璃珠的三角瓶、带棉塞的无菌试管、无棉塞的空试管、培养皿、吸管、各种包装纸、牛皮纸、绳索、棉花、标签等。 （三）实验程序 据组成成分可分为: 1.合成培养基：由各种纯化学物质按一定比例配制成。 2.半合成培养基：有一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。 3.天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成。 从培养基的物理状态可分为 1.液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。 2.固体培养基：在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状态的培养基或农副产品培养基。 3.半固体培养基：在液体培养基中加入0.2～0.5%凝固剂而成的半固体状培养基。 常用凝固剂为琼脂（其次为明胶），又叫洋菜、冻粉。 吸取 30％牛肉膏 2mL；50％蛋白胨 2mL；30％氯化钠 2mL；加入有刻度的搪瓷烧杯中，然后用自来水补足到200mL。用玻棒搅匀，在电炉上稍加热，调 pH 至7.4 加琼脂4g，加热熔化，用玻棒不断搅拌，至琼脂完全溶解为止，趁热在漏斗架上装试带有棉塞的无菌试管，装置1／5的试管高度共12支，作斜面培装管。 用铝壳试管帽各装10ML，越试管高度的1／2以上，用作分离时倒平板用。 培养基的配方及配制-2 马铃薯（或豆芽汁）蔗糖（或葡萄糖）琼脂培养基（用于分离和培养真菌之用，是一种半合成培养基），其配方如下： 去皮马铃薯 200g 蔗糖（或葡萄糖） 20g 自来水 1000mL 琼脂 20g pH 自然 灭菌： （含蔗糖）0.1MPa 20rain （含葡萄糖）0．1kg／cm 30min 培养基的配方及配制-3 淀粉琼脂培养基（高氏一号Gause′1），用于分离和培养放线菌，是一种合成培养基。 可溶性淀粉 20.0g