DNA重组技术的基本工具课件(人教选修III).ppt

(3)氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为____________________，其作用是 _________________________。 (4)下列常在基因工程中用作载体的是(　　) A．苏云金芽孢杆菌抗虫基因 B．土壤农杆菌中的RNA分子 C．大肠杆菌的质粒 D．动物细胞的染色体 【思路点拨】　本题通过质粒结构的模式图考查质粒的功能和特点，分析如下： 【探规寻律】　(1)主动运输中载体的化学本质是蛋白质，其作用是运输离子、氨基酸、核苷酸等物质进出细胞。 (2)基因工程中的载体的化学本质是DNA，其作用是携带目的基因进入受体细胞。 山东水浒书业有限公司· 优化方案系列丛书 专题1 基因工程 基础自主梳理 核心要点突破 知能过关演练 山东水浒书业有限公司· 优化方案系列丛书 专题1 基因工程 基础自主梳理 核心要点突破 知能过关演练 返回 * 1．1　DNA重组技术的基本工具 课标领航 1．了解限制酶及DNA连接酶的来源。 2．掌握限制酶及DNA连接酶的作用。 3．理解载体需具备的条件。 【重点】　三种工具的作用。 【难点】　黏性末端和平末端；载体的特点。 转基因夜光猫 美国新奥尔良奥德班濒危物种研究中心为探索一些人类疾病的治疗方法，以猫为实验对象(猫的基因构成与人类相似)进行了一系列实验。为了了解外源基因是否可 情景导航 以安全地移植到猫科动物的基因序列中，该研究中心利用基因工程技术培育出美国首只转基因夜光猫。紫外线灯光下夜光猫的眼睛、牙床和舌头会发出鲜艳的橙黄色的荧光。夜光猫的培育施工是在DNA分子水平上进行的，在微小的DNA分子上进行的操作，需要专门的工具。这些工具是什么？各自的作用是什么？让我们一起来了解一下吧！ 核心要点突破 基础自主梳理 知能过关演练 1．1　 DNA重 组 技 术 的 基 本 工 基础自主梳理 一、基因工程的概念 1．基因工程的别名：DNA重组技术。 2．操作环境：生物体外。 3．操作对象：______。 4．操作水平：_______________。 5．基本过程：________________________。 6．结果：人类需要的新的生物类型和生物产品。 基因 DNA分子水平 剪切→拼接→导入→表达 核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 原核 平末端 2．DNA连接酶——“分子缝合针” (1)作用：将双链DNA片段缝合起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的___________。 (2)种类 ①E.coliDNA连接酶：只能缝合双链DNA的_____________。 ②T4DNA连接酶：既可缝合双链DNA的黏性末端，又可缝合双链DNA的________。 磷酸二酯键 黏性 末端 平末端 思考感悟 限制酶和DNA连接酶作用的位点相同吗？ 【提示】　相同。都是磷酸二酯键。 自我复制 限制酶切割位点 核心要点突破 利用图解法理解记忆限制酶的有关问题 1．识别序列的组成 大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，例如EcoRI、Sma I限制酶的识别序列，也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成。 2．限制酶都是切割识别特定的核苷酸序列的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 3．限制酶切出的黏性末端和平末端的区别： (2011年雅礼中学高二检测)基因工程中，须使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是－G↓GATCC－，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是－↓GATC－。根据图示判断下列操作正确的是(　　) 例1 A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 【尝试解答】　D 【解析】 　首先把目的基因切下来要用到限制酶Ⅱ；如果再用限制酶Ⅱ切割质粒，则2个标记基因都被切开，标记基因将失去作用。而用限制酶Ⅰ切割质粒可保留一个标记基因，而产生的黏性末端和限制酶Ⅱ切割下来的目的基因可以互补配对。 【互动探究】　上题中限制酶Ⅰ切开化学键后产生哪种类型的末端？ 【提示】　黏性末端。 【易误警示】　(1)限制性核酸内切酶是一类酶而不是一种酶。 (2)限制性核酸内切酶作用的化学键为磷酸二酯键，而不是氢键。 (3)不同种类的限制性核酸内切酶识别与切割的位点不同，这与酶的专一性是一致的。 与DNA有关的各种酶比较 名称 作用 参与生理过程应用 作用位点(如图) DNA连接酶 连接两个DNA片段 基因工程 a 限制性内切酶 切割某种特定的脱氧核苷酸序列 a DNA聚合酶 在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧核苷酸 DNA复制 a 名称 作用 参与生理过程应用 作用位点(如图) RNA聚合酶 在核苷酸链上添加单个核苷酸 转