胚胎干细胞诱导分化机制及方法.docx

【摘要】 胚胎干细胞是来源于附植前胚胎的内细胞团或附植后胎儿的原始生殖细胞具有发育全能性的细胞。近年来在胚胎干细胞分化机制研究和定向诱导分化方面都有长足进展，但其分化机制和定向分化的方法一直是人们需要解决的难点问题，本文主要就胚胎干细胞的定向分化机制、方法及目前存在的问题等方面进行概括性论述。 【关键词】 胚胎干细胞 诱导分化 机制 方法 The study on mechanism and methods on induced differentiation of embryonic stem cells LI Lin-feng,BAI Xiu-juan,GUAN Wei-jun.Institute of Animal Sciences,Chinese Academy of Agricaltural Sciences,Beijing 100094,China 【Abstract】 Embryonic stem cell is a kind of undifferentiated pluripotent stem cell, which stems from preimplantation ICM or early fetus primordial germ cell. The research about differentiation of embryonic stem cell has been a hotspot in medical field now, but the mechanism of differentiation and the directional differentiation have not known very well. Recently, there are dramatic developments in these fields, this paper elaborated the mechanisms differentiation on induced differentiation of embryonic stem cells, methods on induced differentiation of embryonic stem cells, questions on induced differentiation of embryonic stem cells. 【Key words】 embryonic stem cell; induced differentiation; mechanism; method 自1981年英国的Evans等从小鼠囊胚的内细胞团（Inner cell mass，ICM）分离建立胚胎干细胞（Embryonic stem cells，ES细胞）以来，ES细胞的研究就一直是各国研究的热点。近两年，ES细胞分化诱导以及调控方面的研究取得了很多重要的进展，已从ES细胞诱导出神经细胞、心肌细胞、血管和内皮细胞等。利用ES细胞的定向分化可望在基因研究、细胞治疗和组织器官替代治疗等的研究中发挥重要作用。 　　1 ES细胞定向分化的调节机制 自1988年发现了白血病抑制因子能抑制ES细胞分化后，人们就开始研究其定向分化，通过将外源基因转入ES细胞研究其表达及微环境对细胞分化的影响，认为ES细胞的分化受内源性因素和外源性因素的共同调节。分化机制如下。 1.1 内源性影响因素 内源性因素即不同基因在不同时间和空间的开启和关闭及各种转录因子等。从分子水平来看，ES细胞分化的本质问题是基因表达调控。 1.1.1 基因的差异表达 在个体发育中，基因按照一定程序，有选择地相继活化的现象称为基因的差异表达。在胚胎发育过程中所以能相继分化出各种新类型细胞，就是由于相关基因相继活化而合成特异蛋白质的结果。Cross等［1］研究证明细胞定型时是通过强化某些基因的表达并抑制另一些基因的表达来形成某个单一谱系所特有的基因表达型。如缺乏干细胞白血病转录因子的ES细胞不能分化为血细胞和内皮细胞共同的前体细胞。 1.1.2 基因的不同表达水平 有些基因如Oct-4基因和Nanog基因等在体内通过不同的表达水平来调控ES细胞的分化。 1.1.2.1 通过Oct-4基因的不同表达水平调控ES细胞分化 Oct-4基因是ES细胞的一个特异标志分子。Oct-4是一种调节性基因，它的职责是控制其他基因的表达。无论是在体内还是体外，Oct-4基因只在全能或多能性细胞如ES细胞和EG细胞中表达。Oct-4基因的敲除使小鼠胚胎不能形成ICM，而完全由滋养外胚层组成，并在植入时死亡。RNA干扰实