专题2 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 课题背景 尿素是一种重要的农业氮肥。但是尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氮之后,才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶。 尿素最初是从人的尿液中发现的。 1828年,德国化学家维勒成功地通过无机物的化学反映合成了尿素,揭开了历史上人工合成有机物的新篇章。 研究思路 筛选菌株 PCR的自动化需要耐高温的 DNA聚合酶,这种酶要能忍受93℃左右的高温。 科学家从水生耐热细菌Taq中分离到耐高温的Taq DNA 聚合酶。 为什么Taq 细菌能从热泉中被筛选出来呢? 因为热泉70--80℃的高温条件淘汰了绝大多数微生物,而使耐高温的Taq 细菌脱颖而出。 实验室微生物的筛选原理 应用筛选 Taq 细菌的原理,人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。 统计菌落数目 常用稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目。样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。为保证结果准确,一般选择菌落数30—300的平板计数。 设置对照 设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果
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